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- YLKBIO
- YLK-PCR5112
- 国产
- 2026年05月26日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
90
- 英文名：
/
- 保质期：
1年
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50T
产品名称：玉米矮小花叶病毒RT-PCR试剂盒
产品规格：50T
保存及有效期：请于-20℃条件下保存，有效期 12 个月。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：样品模板
产品特点：
1. 一站式，用户不需要单独准备每种成分，包括引物和对照。
2. 根据产品相关的保守基因序列设计的引物，具有良好的特异性。
3. 灵敏度可以达到 1000 拷贝/反应。
4. 使用一管式 RT-PCR 技术，RT 和 PCR 两步在一个试管内完成，不需要中间 转移样品，降低了操作误差和可能的污染。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 RT-PCR。
6. 本产品只能用于科研，不能用于临床。
玉米矮小花叶病毒RT-PCR试剂盒包装规格及成分（具体信息详见说明书）：
| 编号 |
成分 |
规格 |
| 试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
| 试剂二 |
超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
| 试剂三 |
引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂四 |
阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） |
| 说明书 |
使用手册 | 1 份 |
玉米矮小花叶病毒RT-PCR试剂盒注意事项：
1.所有操作严格按照说明书进行；
2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3.反应液应避光保存；
4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7.实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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文献和实验限制了其应用： 1） 花椰菜花叶病毒的大小，即使是切除了非必须序列，花椰菜花叶病毒载体的承载插入片段的能力还是有限的，只能插入很小的片段。 2） 花椰菜花叶病毒的寄主范围非常窄，主要是芸苔属植物如芜菁、甘蓝和花椰菜等。 二价病毒可能比较有潜力，侵染重要的作物，如玉米和小麦，然而在侵染过程中，二价病毒重新排列并删除部分序列，搅乱插入的DNA 序列。这种病毒可引起破坏性的侵染，需要严格的防护，防止载体从寄主中逃逸侵染自然中的植物。所以花椰菜花叶病毒和二价病毒作为载体还需要进一步的改造。 四
MCMV 和 SCMV 复合侵染玉米引起玉米组织中 siRNAs 的积累
的靶标，被切割后的病毒 RNA 可以被 RDR 识别，并将其加工成双链 RNA,再一次被 DCL 蛋白切割形成次级 vsiRNA.初级和次级 vsiRNA 没有本质上的区别，都可以作用于靶标，发挥抗病毒的功能。 玉米褪绿斑驳病毒（MCMV）与侵染玉米的马铃薯 Y 病毒科病毒，如玉米矮花叶病毒（MDMV）、小麦条纹花叶病毒（WSMV）和甘蔗花叶病毒（SCMV），复合侵染时引起玉米致死性坏死（MLN），对玉米产量造成很大的威胁。虽然有报道称马铃薯 Y 病毒属病毒编码的沉默抑制子 HC-Pro
的5'和3’末端的有效方法，以其简单、快速、廉价等优势而受到越来越多的重视。经典的RACE技术是由Frohman等(1988)发明的一项技术，主要通过RT-PCR技术由已知部分cDNA序列来得到完整的cDNA5’和3’端，包括单边PCR和锚定PCR。该技术提出以来经过不断发展和完善，克服了早期技术步骤多、时间长、特异性差的缺点(Frohman等,1995:Schaefer,l995: Chen,1998: Bespalova等,1998: Matz等11999)。对传统RACE技术的改进主要是引物设计及RT-PCR
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