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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
55
- 保质期:
有效期 12 个月
- 供应商:
上海帛科
- 保存条件:
避光-20℃储存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 蛙属虹彩病毒(RIV)PCR检测方法(荧光-PCR法) | 50T | BK-P63978 |
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,引物经过优化,灵敏性高,分析灵敏度可以达到 100 拷贝/反应,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标高度保守区设计,不会跟其他生物的 DNA发生交叉反应,本产品足够 50 次 20μL 体系的染料法荧光定量 PCR 反应,既可用于定性,也可用于定量。用于定量时线性范围至少5个数量级。
蛙属虹彩病毒(RIV)PCR检测方法(荧光-PCR法)【试剂组成】
| 名 称 | 规 格 |
| 2×SYBR qPCR MasterMix | 0.5mL×1管 |
| 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL×1 管 |
| 超纯水 | 1mL×1 管 |
| 染料法qPCR 引物混合液 | 100μL×1 管 |
| qPCR 阳性对照(1×10E7 拷贝/μL) | 50μL ×1 管 |
蛙属虹彩病毒(RIV)PCR检测方法(荧光-PCR法)【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以 10E1-10E6 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的 DNA 片段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 4 号管中加入 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E4 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有 N 个样品,最好设置 N+2 个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 第 6 步所得的第 4 号稀释液(1×10E4 拷贝/μL)再加上一定量的水使总体积跟核酸纯化试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为 PC。另外用水作为 NC。
2.2核酸提取:核酸提取可以采用公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
| 黑色普雷沃菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 输出蛋白3ELISA试剂盒 XPO3免费代测试剂 |
| 鸭乙型肝炎病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 抗磷脂酰甘油抗体ELISA试剂盒 IgA免费代测试剂 |
| 试对虾杆状病毒染料法荧光定量PCR剂盒 | 层黏连蛋白α4ELISA试剂盒 |
| 海鱼分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 抗凝血素抗体ELISA试剂盒 |
| 小孢子酒曲菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 抗药蛋白ELISA试剂盒 |
| 东方泰勒虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 柯萨奇病毒IgEELISA试剂盒 |
| 登革热病毒Ⅲ、Ⅳ型分型PCR检测试剂盒 | 可溶性转铁蛋白受体ELISA试剂盒 |
| 雅氏瓦螨PCR检测试剂盒 | 酪氨酸磺基转移酶1ELISA试剂盒 |
| 鸭源性成分Co基因(Duck-Co)检测试剂盒 | 犁鼻1受体5ELISA试剂盒 |
| 凋亡抑制蛋白Livin基因PCR检测试剂盒 | 磷酸甘油酸变位酶2ELISA试剂盒 |
| 星状病毒和札如病毒PCR检测试剂盒(荧光PCR法) | 人糖胺聚糖(GAG)ELISA Kit |
| 大青叶染料法PCR鉴定试剂盒 | 大鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)试剂盒ELISA |
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文献和实验。第(2)步的漂洗后可用PCR检测以确定标本是否被扩增产物或重组质粒污染。 5.RS-PCR法(RNA-specificPCR) 也称为链特异性PCR,主要指用于RNA模板的特异性PCR法,该法可明显降低假阳性而不影响PCR的敏感性。其关键在于设计引物,逆转录引物的3�端(A区)有20个核苷酸左右为模板的特异性互不序列,5�端20个核苷酸(C区)为附加修饰碱基。与mRNA逆转录后,经超速离心使cDNA与多余引物分开,再用和第二引物(C)以第一链cDNA为模板合成第二链cDNA,以后
甲基化荧光检测(methylight)是利用荧光定量性PCR检测亚硫酸氢钠处理后的序列改变。在TaqManR技术中,可以使用3种不同的单核苷酸(正义引物、反义引物和荧光杂交探针),进行不同序列的检测。与已存在的技术相比,甲基化荧光检测最明显的优点就是能同时对几百甚至几千例样品迅速检测。 高敏感、快速是本方法最显著的特点,它可以在非甲基化等位基因超出10 000倍的情况下精确地检测到甲基化的等位基因并定量,而且可以做多样本、多基因位点的快速
【求助】miRNA mimic qRT-PCR检测可以提高多少倍?
nvonne 我购买的miRNA mimic 带FAM标记,本打算用流式检测转染效率,但发现荧光信号很弱,转染后采用定量PCR检测miRNA的表达变化,相对定量分析,发现mimic组比NC阴性对照组的miRNA表达量提高了100多倍,这虽然表明转染mimic成功,但总感觉这么高的变化有点太离谱了是不是?也没查到相关文献,谁能给我一些参考?非常感谢 zhujoker 顺转就是这么高,我的也是这样,有的能够上调1000倍
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