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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
41
- 保质期:
有效期 12 个月
- 供应商:
上海帛科
- 保存条件:
避光-20℃储存
- 规格:
50T
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,引物经过优化,灵敏性高,分析灵敏度可以达到 100 拷贝/反应,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标高度保守区设计,不会跟其他生物的 DNA发生交叉反应,本产品足够 50 次 20μL 体系的染料法荧光定量 PCR 反应,既可用于定性,也可用于定量。用于定量时线性范围至少5个数量级。
商品属性:
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 幽门螺杆菌和毒力基因(VacA/CagA)PCR检测试剂盒(荧光 PCR 法) | 50T | BK-P63507 |
| 名 称 | 规 格 |
| 2×SYBR qPCR MasterMix | 0.5mL×1管 |
| 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL×1 管 |
| 超纯水 | 1mL×1 管 |
| 染料法qPCR 引物混合液 | 100μL×1 管 |
| qPCR 阳性对照(1×10E7 拷贝/μL) | 50μL ×1 管 |
幽门螺杆菌和毒力基因(VacA/CagA)PCR检测试剂盒(荧光 PCR 法)【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以 10E1-10E6 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的 DNA 片段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 4 号管中加入 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E4 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有 N 个样品,最好设置 N+2 个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 第 6 步所得的第 4 号稀释液(1×10E4 拷贝/μL)再加上一定量的水使总体积跟核酸纯化试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为 PC。另外用水作为 NC。
2.2核酸提取:核酸提取可以采用公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
| 牛结节疹病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 四旋蛋白27ELISA试剂盒 TSPAN27免费代测试剂 |
| 尼帕病毒PCR检测试剂盒(荧光PCR法) | 抗α-胞衬蛋白抗体ELISA试剂盒 IgG免费代测试剂 |
| 禽腺病毒C种4型(FADV-C-4)PCR检测试剂盒(荧光-PCR法) | K-乙酰转移酶2AELISA试剂盒 |
| 转轮蟹通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 抗风疹病毒IgG抗体ELISA试剂盒 |
| 微细毛圆线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 抗类免疫缺陷病毒抗体ELISA试剂盒 |
| 粉萆薢探针法PCR鉴定试剂盒 | 抗凝脂ELISA试剂盒 |
| 肥胖带绦虫PCR检测试剂盒 | 抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体ELISA试剂盒 |
| 小麦PCR检测试剂盒 | 抗眼肌抗体ELISA试剂盒 |
| 小肠结肠炎耶尔森菌PCR检测试剂盒 | 柯萨奇病毒腺病毒受体ELISA试剂盒 |
| 非洲猪瘟病毒PCR检测试剂盒(荧光PCR法) | 酪氨酸磺基转移酶1ELISA试剂盒 |
| 豨莶草染料法PCR鉴定试剂盒 | 人8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA Kit |
| 杜克雷嗜血杆菌PCR检测试剂盒供应 | 大鼠骨保护素配体(OPGL)检测试剂盒elisa |
| 淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 人3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA检测试剂盒 |
| 牛传染性鼻气管炎病毒PCR检测试剂盒 | 人抗利尿激素V2受体/精氨酸加压素受体2(AVPR2)试剂盒ELISA |
| 伯氏疏螺旋体PCR检测试剂盒(荧光PCR法) | 人淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)试剂盒 ELISA |
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文献和实验PCR-SSCP法是在非这性聚丙烯酰胺凝胶上,短的单链DNA和RNA分子依其大街基序列不同而形成不同构象,一个碱基的改变将影响其构象而导致其在凝胶上的移动速度改变。其基本原理为单链DNA在中性条件下会形成二级结构,这种二级结构依赖于其碱基组成,即使一个碱基的不同,也会形成不同的二级结构而出刺同的迁移率。由于该法简单快速,因而被广泛用于未知基因突变的检测。用PCR-SSCP法检测小于200bp的PCR产物时,突变检出率可达70%-95%,片段大于400bp时,检出率仅为50%左右,该法可能
领域。例如,可以在PCR扩增中用同位素或荧光素等标记引物或核苷,也可以在电泳后用银染或溴化乙锭染色以显示结果。这里将重点介绍最常用的放射性同位素PCR-SSCP法。在进行PCR扩增特定靶基因序列时,利用γ-32P-ATP标记引物或直接在PCR反应体系中加入α-32P-dCTP进行PCR扩增,使扩增产物带有同位素标记物,然后将扩增产物变性为单链进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,放射自显影显示结果。利用引物标记或碱基掺入法使PCR扩增产物带有同位素标记物,均可使产物信号增强几个数量级。二者相比较,前者经济
,这样可以节约反转录的试剂,cDNA可以多次使用,可用于检测稀有基因是否表达、从极少量细胞中定量检测特定mRNA的表达水平。 3)特异性引物: 最特异的反转录方法是用含目标RNA的互补序列的寡核苷酸作为引物,若PCR反应用二种特异性引物,第一条链的合成可由与mRNA3'端最靠近的配对引物起始。用此类引物仅产生所需要的cDNA,导致更为特异的PCR扩增。 做 Real Time PCR时,用于SYBR Green I/Eva Green 法时的一对引物与一般PCR
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