- ￥3990
- 帛科
- BK-P63460
- 国产
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
38
- 保质期：
有效期 12 个月
- 供应商：
上海帛科
- 保存条件：
避光-20℃储存
- 规格：
50T
| 名 称 | 规 格 |
| 2×SYBR qPCR MasterMix | 0.5mL×1管 |
| 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL×1 管 |
| 超纯水 | 1mL×1 管 |
| 染料法qPCR 引物混合液 | 100μL×1 管 |
| qPCR 阳性对照(1×10E7 拷贝/μL) | 50μL ×1 管 |
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 拟态弧菌PCR检测试剂盒（荧光PCR法） | 50T | BK-P63460 |
拟态弧菌PCR检测试剂盒（荧光PCR法）【使用方法】
试剂准备（试剂准备区）
稀释标准曲线样品（以 10E1-10E6 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的 DNA 片段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2，1。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。
3. 在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在 4 号管中加入 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E4 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理（样本处理区）
2.1如果有 N 个样品，最好设置 N+2 个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 第 6 步所得的第 4 号稀释液（1×10E4 拷贝/μL）再加上一定量的水使总体积跟核酸纯化试剂盒所要求的起始样本体积一样，以此作为 PC。另外用水作为 NC。
2.2核酸提取：核酸提取可以采用公司的核酸提取或纯化试剂，操作方法按照说明书进行。
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本试剂盒即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，引物经过优化，灵敏性高，分析灵敏度可以达到 100 拷贝/反应，提供阳性对照，便于区分假阴性样品，特异性高，引物是根据指标高度保守区设计，不会跟其他生物的 DNA发生交叉反应，本产品足够 50 次 20μL 体系的染料法荧光定量 PCR 反应，既可用于定性，也可用于定量。用于定量时线性范围至少5个数量级。
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文献和实验LightCycler通过实时荧光PCR技术进行DNA甲基化分析
的定量。 更多有关特定CpG位点的甲基化的详细信息，可采用重亚硫酸氢盐修饰后测序分析。 LightCycler主要应用：实时荧光PCR技术进行快速准确的DNA甲基化分析 我们使用罗氏诊断公司的LightCycler®480高分辨熔解扩增试剂盒在LightCycler®480实时荧光PCR仪上，通过MS-HRM测定法对两种已知的经过启动子（FANCE和MGMT）甲基化的DNA修复基因的检测性能。 材料和方法 将多种细胞株的DNA样本作为检测模板。每μg的每种DNA样本都经过重亚硫酸盐修饰
和操作的不断发展和完善，以实时荧光PCR技术为核心的检测试剂盒纷纷问世，逐步趋向于灵敏特异、快速精确和自动化。当然，由于成本较高，操作难度大，目前在临床疾病的诊断和治疗上还未得到普及。因此，如何进一步提高检测方法灵敏度、简化操作程序、缩短检测时间、消除非特异因素干扰以及采用统一的、标准化的方法已成为实时荧光PCR检测试剂盒未来研究的主要方向。许多研究者趋向于将更多的精力投入实时荧光定量PCR方法的研究开发，使之进一步合理化，以增加试验的可信度；通过使其涉及的所有过程实现最终自动化，来提高临床
。因此，如何进一步提高检测方法灵敏度、简化操作程序、缩短检测时间、消除非特异因素干扰以及采用统一的、标准化的方法已成为实时荧光PCR检测试剂盒未来研究的主要方向。许多研究者趋向于将更多的精力投入实时荧光定量PCR方法的研究开发，使之进一步合理化，以增加试验的可信度；通过使其涉及的所有过程实现最终自动化，来提高临床检验结果的准确性。毫无疑问，在不久的将来，实时荧光定量PCR技术将以其显著的优势，在分子生物学、实验医学，特别是在临床医学领域中得到越来越广泛的应用。
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