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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
57
- 英文名:
Vibrio mimicusPCR
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 拟态弧菌PCR检测试剂盒 | 50T | LZ-P1460 |
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| DH82狗肾恶性组织细胞增生症细胞 DH82 dog kidney maligna histiocytosis cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS | Rhesus antibody Rh HEF1 蛋白激酶底物相关蛋白抗体 规格 0.2ml | HumanProteinPhosphatase,PPELISAKit 人蛋酸酶(PP)elisa试剂盒 |
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| T-24(人膀胱癌细胞) 5×106cells/瓶×2 | cIAP1: 凋亡抑制因子1抗体 0.2ml | 血液乙脱氢酶2活性荧光定量检测试剂盒20次 |
| LAN-6细胞,神经母细胞瘤细胞 人绒癌细胞,JEG-3细胞 人毛细胞RNAHHDPC miRNA5 μg | Humanaldehydedehydrogenase,ALDHelisa试剂盒 | 大鼠内皮素-1受体(rat ET-1R) 作用: ELISA 分装 |
| 人肺泡上皮细胞cDNAHPAEpiC cDNA | 纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)elisa试剂盒 | 基质金属蛋白酶 -13(Human MMP-13) 作用: ELISA 分装 |
| EGFR5: 表皮生长因子受体5抗体 0.2ml | 人抗狂犬病毒抗体(ai-RV)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 | 人补体片断4b(C4b)elisa试剂盒 |
| Anti-ATF2/FITC 荧光素标记活化复制因子2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | ELISAKitPDGF-BB小鼠血小板衍生生长因子BB规格:48T/96T | 人抗百日咳病毒(PT-Ab)elisa试剂盒 |
| Anti-FBN1 /FITC 荧光素标记原纤维蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | 拟态弧菌PCR检测试剂盒Humaniercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISAKit 人细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)elisa试剂盒 | 人血管生成素4elisa试剂盒 |
| RBBP6: 增殖潜能相关蛋白抗体 0.1ml | 兔糖化血红蛋白A1c(A1c)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 | 小鼠CD8分子(CD8)elisa试剂盒 |
| Rhesus antibody Rh Protein A 重组蛋白A抗体 规格 0.1ml | 组织CDK5/P25激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次 | M13噬菌体单链基因组DNA快速提取试剂盒 Rapid exaction kit for M13 phage single chain genomic DNA |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验时样本之间干扰。 Q:说明书上写细胞量为 1~5 × 105 ,细胞量多的话对检测结果有没有影响? A:建议细胞量最多不要超过 106个,过量的细胞相当于染料被稀释,影响染色和分离效果。一般 2×105 个细胞足够进行凋亡检测了,通常情况下检测 10,000 个细胞就能得到比较好的结果。 Q:是否可以用 PBS 替代凋亡试剂盒里面的 Binding Buffer? A:不行,Binding Buffer 是必须要加的,Annexin V 与 PS 的结合依赖 Ca2+,Binding
化作用——氧分子、过氧化氢、氧自由基 5. 表面活性剂和去污剂 6.变性剂——脲和盐酸胍、高浓度盐、螯合、有机溶剂 7. 重金属离子和巯基试剂 8. 热 9. 机械力 10. 冷冻和脱水 11. 辐射 5. 酶活计算 ① 酶活定义 酶的活力单位:酶的1个活力单位是在该酶的最适条件下,在25℃、1 min内催 1μmol的底物转化为产物的酶量。 ② 定时法的计算 将酶与底物在特定条件下孵育,酶促反应开始进行,经过一定时间后,用终止液终止反应,通过化学或生物化学的方法测出底物或产物的总变化量,除以时间即可
针对同一指标,生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗?
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律,但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应,其反应过程可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图,如下所示: 延迟区:无规律可寻。 等速区:对应的是速率法,一般应用于酶活力的检测。 过渡区:对应的是固定时间法,目的是解决某些化学反应的非特异性问题,提高准确度。 平衡区:对应的是终点法,主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
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