- ￥4490
- 帛科
- BK-P64481
- 国产
- 2025年10月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
26
- 保质期：
有效期 12 个月
- 供应商：
上海帛科
- 保存条件：
避光-20℃储存
- 规格：
50T
| 名 称 | 规 格 |
| 2×SYBR qPCR MasterMix | 0.5mL×1管 |
| 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL×1 管 |
| 超纯水 | 1mL×1 管 |
| 染料法qPCR 引物混合液 | 100μL×1 管 |
| qPCR 阳性对照(1×10E7 拷贝/μL) | 50μL ×1 管 |
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 绵羊源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | BK-P64481 |
绵羊源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒【使用方法】
试剂准备（试剂准备区）
稀释标准曲线样品（以 10E1-10E6 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的 DNA 片段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2，1。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。
3. 在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在 4 号管中加入 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E4 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理（样本处理区）
2.1如果有 N 个样品，最好设置 N+2 个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 第 6 步所得的第 4 号稀释液（1×10E4 拷贝/μL）再加上一定量的水使总体积跟核酸纯化试剂盒所要求的起始样本体积一样，以此作为 PC。另外用水作为 NC。
2.2核酸提取：核酸提取可以采用公司的核酸提取或纯化试剂，操作方法按照说明书进行。
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本试剂盒即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，引物经过优化，灵敏性高，分析灵敏度可以达到 100 拷贝/反应，提供阳性对照，便于区分假阴性样品，特异性高，引物是根据指标高度保守区设计，不会跟其他生物的 DNA发生交叉反应，本产品足够 50 次 20μL 体系的染料法荧光定量 PCR 反应，既可用于定性，也可用于定量。用于定量时线性范围至少5个数量级。
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文献和实验如果您的样本是组织，取样的过程非常重要。组织内部是有内源性 RNase 存在的，组织离体后内源性 RNase 则开始发挥作用，RNA 产生降解。所以离体的组织必须立马放在液氮中速冻，之后转移至 -80℃ 长期保存，且避免反复冻融。研磨组织的过程中需要保证在液氮环境中研磨。RNA 提取的过程中，保证样本的上样量不超过提取试剂盒说明书中规定的最大上样量，上样量过多，同样会造成 RNA 降解。 ②如果您的样本是细胞，则样本搜集过程要简单的多了，只要保证细胞状态良好（细胞状态差也容易造成提取的 RNA 降解
标记（生物素、荧光、地高辛和Eu3+等）、引入与蛋白质结合的DNA序列、引入突变位点、插入与缺失突变序列和引入启动子序列等。 2 特定PCR的引物设计 在尽量遵循引物设计基本原则的同时，根据不同的实验目的，需要注意一些相应的事项，总结如下： 01 荧光定量PCR 荧光定量PCR有染料法和探针法两种。染料法只需要设计引物，而探针法除设计引物之外还得设计一条探针。 引物设计要尽量满足以下要求： 确保模板是cDNA
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