- ￥3990
- 帛科
- BK-P63437
- 国产
- 2026年04月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
31
- 保质期：
有效期 12 个月
- 供应商：
上海帛科
- 保存条件：
避光-20℃储存
- 规格：
50T
1．避光-20℃储存，有效期 12 个月。
2．低温运输不能超过 4 天；开封后避光-20℃储存，对有效期没有影响。避免反复冻融，冻融 6 次不影响检测效果。
3．生产日期、有效期至：见外包装盒。
【适用仪器】
适用于 ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche480 等全自动荧光PCR 检测仪。
【样本要求】
1．样本种类：鼻/咽拭子、痰液、支气管肺泡灌洗液；培养物等样品。
2．保存条件：采集的标本应及时送检，24 小时内检测的应 4℃保存，超过 24 小时的最好-70℃保存，并避免反复冻融。
诺如病毒 GI/GII 型和札如病毒PCR检测试 剂盒（荧光 PCR 法）【检测方法】
1 ． 试剂准备（试剂准备区）
将试剂盒各组分置 4℃避光融化，充分混匀后瞬间离心。计算试剂使用份数 N（N=样本数+1 管阳性对照+1 管阴性对照），根据下表配置反应体系mix，加入一适当体积离心管中，充分混匀后瞬间离心，按 20μL 分装至 PCR 反应管/板，并转移至样本处理区。
| 组分 | 体积（μL ） |
| qPCR 预混液（含酶） | 16 |
| 引物探针 | 4 |
| 总体积（反应体系 mix ） | 20 |
【结果判定】
通过溶解曲线分析的结果排除无效数据。有 Ct 值，但 Tm 值跟阳性对照 Tm不一样的样品（包括对照和待测样品），归为假阳性，数据无效，不予以分析。Tm 跟阳性对照 Tm 一致的，为有效 Ct。
如果两种阴性对照的溶解曲线所得 Tm 值跟阳性对照的 Tm 值一样，说明环境或试剂可能有过去的 PCR 扩增产物污染，则此次实验无效，需要解决污染问题再进行实验。
如果两种阴性对照（样品制备阴性对照和 PCR 阴性对照）是假阳性，可以继续分析其它样品有效数据。
对定量检测，以阳性对照样品的浓度的 log 值为横轴，以有效 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的有效 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的 log 值，再换算出待测样品的 DNA 浓度。
对定性检测，则有有效 Ct 值的为阳性，无有效 Ct 值的为阴性。
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1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
3．待测标本若不及时检测，应保存于-20℃或-70℃。
4．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
5．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
6．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。
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文献和实验度与 RIA 法相当，目前该方法已成为美国疾病预防控制中心检测NLV抗原和抗体的标准实验方法之一。1992年Jiang 等重组杆状病毒表达诺如病毒（NV）衣壳蛋白成功后，建立起的 NV 酶联免疫检测方法快速、灵敏、经济，其不足之处是免疫反应的株型特异性太强，所以应用范围还比较窄。酶链免疫法特异性强，灵敏度高，诊断迅速，且较经济，是目前可广泛应用的检测方法。由于NLV培养还未成功，原来用作试剂的病毒抗原数量受到限制，现在，用分子生物学技术已经可以人工重组NV的衣壳蛋白，从而解决了上述问题。 分子
对照:被检的标本是血清就用鉴定后的正常血清作对照；被检的标本是组织细胞就用相应的组织细胞作对照。②试剂 对照:在PCR 试剂中不加模板DNA 或RNA，进行PCR 扩增，以监测试剂是否污染。 3、重复性试验 4、选择不同区域的引物进行PCR 扩增 三、防止污染的方法 1、合理分隔实验室:将样品的处理、配制PCR 反应液、PCR 循环扩增及PCR 产物的鉴定 等步骤分区或分室进行，特别注意样本处理及PCR 产物的鉴定应与其它步骤严格分开。最好能划分①标本处理区；②PCR 反应液制备区；③
的，该法试用于环状靶分子系列。 四、其它PCR检测方法： （一）两步法：是指在用套式PCR方法扩增某些含量低微的标本时，两对引物在同一个管中以简化步骤，减少污染。通常第一步进行20-25个循环，扩增外引物片段；第二步再进行10个循环，扩增内引物片段。两步法对内外引物的Tm值有特殊要求，即内外引物的退火温度高（如68℃），在此温度下内引物不与模板退火，然后降低退火温度（至55℃）再扩增内引物片段，这样，在操作过程中，仅打开PCR反应管一次，大大减少了污染的可能性。（二）荧光法：亦称荧光PCR技术
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