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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
55
- 保质期:
有效期 12 个月
- 供应商:
上海帛科
- 保存条件:
避光-20℃储存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 极小棒杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | BKP6589 |
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,引物经过优化,灵敏性高,分析灵敏度可以达到 100 拷贝/反应,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标高度保守区设计,不会跟其他生物的 DNA发生交叉反应,本产品足够 50 次 20μL 体系的染料法荧光定量 PCR 反应,既可用于定性,也可用于定量。用于定量时线性范围至少5个数量级。
极小棒杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒【试剂组成】
| 名 称 | 规 格 |
| 2×SYBR qPCR MasterMix | 0.5mL×1管 |
| 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL×1 管 |
| 超纯水 | 1mL×1 管 |
| 染料法qPCR 引物混合液 | 100μL×1 管 |
| qPCR 阳性对照(1×10E7 拷贝/μL) | 50μL ×1 管 |
极小棒杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以 10E1-10E6 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的 DNA 片段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 4 号管中加入 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E4 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有 N 个样品,最好设置 N+2 个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 第 6 步所得的第 4 号稀释液(1×10E4 拷贝/μL)再加上一定量的水使总体积跟核酸纯化试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为 PC。另外用水作为 NC。
2.2核酸提取:核酸提取可以采用公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
| 绵羊腺病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 17酮皮质类固醇ELISA试剂盒 17-KS免费代测试剂 |
| 人偏肺病毒PCR检测试剂盒说明书 | 纺锤体蛋白3ELISA试剂盒 SPIN3免费代测试剂 |
| 鲁氏不动杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 电碳酸氢钠协同转运蛋白4ELISA试剂盒 |
| 猪、牛、羊布鲁氏菌病PCR检测试剂盒 | 肺炎衣原体抗原ELISA试剂盒 |
| 牛纽布病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 副肿瘤性天疱疮ELISA试剂盒 |
| 莫巴拉病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 钙黏蛋白22ELISA试剂盒 |
| 莫佩亚病毒PCR检测试剂盒 | 甘丙肽受体2ELISA试剂盒 |
| 牛疱疹病毒3型探针法荧光定量PCR试剂盒(暂停) | 肝配蛋白A3ELISA试剂盒 |
| 牛纽布病毒PCR检测试剂盒供应 | 干扰素活化基因205ELISA试剂盒 |
| 莫拉氏菌属通用PCR检测试剂盒 | 谷氨酰胺果糖-6-磷酸转氨酶2ELISA试剂盒 |
| 牡蛎疱疹病毒(OsHV)PCR检测试剂盒(荧光-PCR法) | 人Prominin 2(PROM2)试剂盒ELISA |
| 麻疹病毒 / 风疹病毒 / 腮腺炎病毒核酸检测试剂盒(三重荧光 PCR 法 ) | 人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒 |
| 佛手探针法PCR鉴定试剂盒 | 人CD45分子(CD45)检测试剂盒elisa |
| 美人鱼发光杆菌PCR检测试剂盒 | 人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA检测试剂盒 |
| 柏氏巴贝斯虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人钙激活中性蛋白酶1(CAPN1)ELISA试剂盒 |
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所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
活细胞RNA酶,植物RNA助提剂PLANTaid帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。♦ 产品特点:1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。2. 不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需
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