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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
60万
- 生长状态:
混合生长
- 运输方式:
常温/干冰
- 器官来源:
肺
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
上皮样
- 物种来源:
人
NCL-H446/LUC
细胞描述
- 来源:人肺
- 形态:上皮样
- 含量:>1x106 细胞数
- 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
- 用途:仅供科研使用。
运输和保存:干冰运输及复苏好存活细胞:(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理:
1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)半贴细胞或贴壁不牢(悬浮)细胞:T25瓶置于37℃培养箱中约2-3h,显微镜下观察细胞的情况,若细胞密度在60%以下,客户需收集T25瓶中的悬浮细胞离心后用完全培养基重悬后打回到原培养瓶中继续培养,若细胞生长70%-90%对细胞进行传代,传代时需要收集培养基中悬浮的细胞离心后回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
- 准备RPMI1640培养基;优质胎牛血清20 %;P/S青霉素-链霉素 1%。
- 注意事项:
当未超过80%汇合度时,将清质量差异可能引起细胞贴壁能力变化,应选用高质量的胎牛血清。
- 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
- 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
细胞处理:
1)冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达70%-90%,即可进行传代培养。
该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞,传代可以参考以下方法:
该细胞用细胞刮铲替代胰酶来对细胞进行处理。用无菌细胞刮铲刮拭细胞附着培养表面将细胞刮落,收集细胞后离心去上清,重悬后接种到新的装有新鲜培养液的培养瓶内。收货后第一次传代1:2进行,后续可以根据实际的情况以1:2~1:4的比例进行传代。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例;
- 1,细胞用细胞刮铲替代胰酶来对细胞进行处理。用无菌细胞刮铲刮拭细胞附着培养表面将细胞刮落,收集细胞。
- 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
- 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
注意事项:
1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。
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文献和实验Transcriptional Control of Hepatitis B Virus
, such as chloramphenicol acetyl transferase (CAT), β-galactosidase β-gal), and luciferase (LUC), have been used for this purpose. Because of the sensitivity and ease of the assay system, LUC has become the reporter molecule most widely used. Alternatively, the levels
a look from the following website just by clicking "Tyrosine Phosphorylation and Dimerization" http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6WSN-43F85YV-2&_user=1111158&_coverDate=06%2F29%2F2001&_rdoc=1&_fmt=full&_orig=search
扫描仪中,都采用机械式的二维X,Y线性扫描技术实现,即X,Y方向都采用直线驱动器和直线导轨实现往复运动。此类装置,由于驱动系统的频率限制,驱动器的扫描惯性大,使得扫描效率低,分析时间相当长;并且往复行程长,对直线导轨的精度要求相当高。二、光机结合的二维扫描系统为同样实现生物芯片的二维扫描,我们的实验装置设计如图2,采用了振镜和大数值孔径的远心f-è物镜相结合实现X方向扫描,Y方向的运动仍采用直线驱动器和直线导轨实现。 系统中,对于f-è物镜,满足x=2fè(è为振镜的摆动角度,f为物镜焦距)的线性
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