SB-734117,607368-97-8

细胞凋亡 WB 不成功？你必须知道文献中的这些案例

. Sci Signal. ; 8（371）： rs2. doi:10.1126/scisignal.2005966.■ 研究方法1. MCF10A-5E 人乳腺上皮细胞激活 Fas 死亡受体，无激活组为对照。2. 分别用 NP-40（不含 SDS 和脱氧胆酸盐），RIPA buffer， Laemmli（SB）样品缓冲液提取蛋白。3. WB 进行 Clv-caspase-8 检测， Hsp90，Tubulin，P38 作为对照。■ 主要发现结果显示，仅在 Laemmli 缓冲液提取的样品中检测到激活

细胞凋亡 WB 没成功，你是不是用了 RIPA？

Immunoblotting. Sci Signal. ; 8(371): rs2. doi:10.1126/scisignal.2005966.➤ 研究方法1. MCF10A-5E 人乳腺上皮细胞激活 Fas 死亡受体，无激活组为对照2. 分别用 NP-40（不含 SDS 和脱氧胆酸盐），RIPA buffer， Laemmil（SB）样品缓冲液提取蛋白3. WB 进行 Clv-caspase-8 检测, Hsp90,Tubulin，P38 作为对照➤ 主要发现结果显示，仅在 Laemmil 缓冲液提取的样品中检测

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2为25mmol/L）5. 维持pH值的buffer：标准PCR缓冲液中Tris－Cl浓度为10mmol/L。室温Tris－Cl将buffer pH值调至8.3～8.8之间，72℃buffer pH值接近7.2。（实验室用10×buffer）6. 一价阳离子：KCl7. 模板DNA：高分子量DNA（>10kb）做模板时，用限制性内切酶先行消化（此酶不切割靶序列），扩增效果更好。PCR反应条件的控制：1.上述组分的浓度2.反应温度和循环次数A 变性温度和时间：90～97℃，通常取95℃、30sB