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土壤精氨酸脱氨酶活性测定试剂盒

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  • ￥440
  • wksubio
  • WS0530F
  • 国内
  • 2026年02月23日
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    • 英文名：

      Soil arginine deaminase activity assay kit

    • CAS号：

      WS0530F

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      24T

    本试剂盒仅供科研使用
    土壤精氨酸脱氨酶活性测定试剂盒说明书
    （货号：WS0530F 分光法 24 样）
    一、产品简介：
    氮素是限制植物生长发育的主要营养元素之一，土壤氮素是植物氮素营养的主要来源。
    其中土壤精氨酸脱氨酶也与土壤中氮转化有着密切关系。
    本试剂盒利用精氨酸脱氨酶水解精氨酸生成NH3-N，该产物在强碱性介质中与次氯酸盐
    和苯酚反应，生成水溶性染料靛酚蓝，通过检测生成的有色物质在630nm的最大光吸收峰，
    进而得出土壤精氨酸脱氨酶活力大小。
    二、试剂盒组分与配制：
    试剂名称
    规格试剂名称 保存要求
    备注
    试剂一
    粉剂 mg×1 瓶
    4℃保存
    临用前加入 18mL 蒸馏水，充分溶
    解备用，用不完的试剂仍 4℃保存；
    试剂二
    液体 30mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂三
    液体 13mL×1 瓶
    4℃保存
    避光保存。
    试剂四
    液体 7mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂五
    A：液体 7mL×2 瓶
    B：液体μL×1 支
    4℃保存
    临用前取 60μL 的 B 液进一瓶 A 液
    中，混匀后作为试剂五使用。混匀
    后的试剂五一周内用完。
    标准品
    液体 1 mL×1 支
    4℃保存
    若重新做标曲，则用到该试剂。
    三、所需的仪器和用品：
    可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、离心机、水浴锅或恒温培养箱、可调
    式移液器、蒸馏水。
    四、土壤精氨酸脱氨酶活性测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本的制备：
    取新鲜土样风干或者 37 度烘箱风干，先粗研磨，过 40 目筛网，备用。
    2、上机检测：
    ① 培养：取 EP 管依次加入：
    试剂名称（
    μL）
    测定管
    对照管
    土样(g)
    0.5
    0.5
    试剂一
    600
    蒸馏水
    600
    混匀，放入 37℃水浴锅或恒温培养箱中孵育 3 小时
    试剂二
    600
    600
    震荡提取 30min，8000rpm，25℃离心 5min，取上清液。
    ② 可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 630nm。
    ③ 显色反应：在 EP 管中依次加入：
    试剂名称（
    μL）
    测定管
    对照管本试剂盒仅供科研使用
    2
    上清液
    60
    60
    蒸馏水
    180
    180
    试剂三
    240
    240
    试剂四
    120
    120
    试剂五
    240
    240
    混匀，37℃放置 20min 后，于 630nm 读取吸光值 A，全部
    液体转移至 1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）中
    ΔA=A 测定管-A 对照管（每个样本做一个自身对照）。
    【注】1. 试剂三和四和五需分开加，不能事先混匀。
    2. 若ΔA 值较小，可增加 37℃孵育时间 T（如由 3 小时增至 6 小时或更多）或在显色反应阶
    段增加上清液量 V1(如增至 120μL，则蒸馏水体积相应减少)；则改变后的 T 和 V1 需代入
    计算公式重新计算。
    3. 若 A 测定的值大于 1.5，可在显色反应阶段减少上清液的量 V1(如减至 20μL，则蒸馏水
    体积相应增加)；则改变后的上清液体积 V1 需代入计算公式重新计算。
    五、结果计算：
    1、标准曲线：y = 1.9393x - 0.004；x 为标准品质量（
    μg），y 为吸光值ΔA 。
    2、土壤酶活定义：每天每克土样中产生 1μg 的 NH3-N 定义为一个酶活力单位。
    土壤精氨酸脱氨酶活力(μg/d/g 土样)=(ΔA+0.004)÷1.9393×(V÷V1)÷W÷T
    =82.5×(ΔA+0.004)÷W
    V---反应总体积，1200μL；
    V1---显色反应中上清液体积，60μL；
    T---反应时间，3h=1/8d；
    W---土壤样本实际取样质量，g。
    附：标准曲线制作过程：
    1 把标准品母液（1mg/mL），用蒸馏水稀释成以下浓度梯度的标准品：0，2，4，6，8，
    10. μg/mL。也可根据实际样本来调整标准品浓度。
    2 在显色反应阶段，按照测定管加样表操作，依据结果即可制作标准曲线。

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