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- 2026年09月17日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
21
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
6个月
- 供应商：
帛科
- 保存条件：
2-8℃冷藏
- 规格：
100管/96样
产品名称：线粒体活性氧产生速率（ROS）生化检测试剂盒
规格：100管/96样
产品分类：氧化与抗氧化系列
实验类型：荧光法
商品详情：
线粒体活性氧产生速率（ROS）生化检测试剂盒测定意义：
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等，研究表明，机体95％以上的活性氧（ROS）都来自于线粒体，其失衡所致的氧化应激与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程有关。
正常情况下，细胞内抗氧化防御系统与氧自由基处于平衡状态，细胞内活性氧（ROS）水平维持在较低的生理范围；在病理情况下，细胞内抗氧化系统与氧自由基的平衡被打破，细胞内活性氧水平过多，就可破坏线粒体酶类、脂类和核酸，使机体出现氧化应激，同时，活性氧还可攻击线粒体DNA产生氧化损伤，导致线粒体ATP合成减少、线粒体膜电位破坏等结构和功能变化。
因此，通过检测活性氧的变化来判断线粒体的功能是否正常具有重要意义。
测定原理：
荧光探针-还原型二氯荧光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可扩散通过线粒体膜，在线粒体内被酯酶水解，形成无荧光的DCFH，DCFH迅速与ROS反应生成荧光物—氧化型二氯荧光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根据上述原理设计了利用荧光法直接定量检测线粒体ROS产生速率的方法。将荧光强度随时间变化的数据点拟合，线性回归直线斜率与ROS产生的速率呈正比。
需自备的仪器和用品：
多功能酶标仪、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液一：液体100mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存；
试剂二：液体20mL×1瓶，4℃保存；
试剂三：液体14uL×1支，4℃保存；
组织样本的前处理：
①总GAPDH酶提取：建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一，冰浴匀浆后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定。
②胞浆和叶绿体GAPDH酶的分离：按照植物组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5～10的比例（建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一），冰浴匀浆后于4℃，200g离心5min，弃沉淀，取上清在4℃，8000g离心10min，取上清用于测定胞浆GAPDH酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震荡溶解后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定叶绿体中GAPDH酶活性。
建议测定总GAPDH酶活性，按照步骤①提取粗酶液，若需要分别测定胞浆和叶绿体中的GAPDH，则按照步骤②提取粗酶液。
细菌或培养细胞的前处理
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
纤维素含量（CLL）生化试剂盒（可见分光光度法）50管/48样可见分光光度法
半纤维素含量生化试剂盒（微量法）100管/96样微量法
半纤维素含量生化试剂盒（可见分光光度法）50管/48样可见分光光度法
N乙酰βD葡萄糖苷酶（NAG）生化试剂盒（微量法）100管/48样微量法
N乙酰βD葡萄糖苷酶（NAG）生化试剂盒（可见分光光度法）50管/24样可见分光光度法
αL阿拉伯呋喃糖苷酶（αLAf）生化试剂盒（微量法）100管/48样微量法
线粒体活性氧产生速率（ROS）生化检测试剂盒带绦虫通用PCR检测试剂盒Taenia spp.PCR
大森林埃博拉病毒PCR检测试剂盒Tai Forest Ebola Virus RTPCR
太米阿米病毒PCR检测试剂盒Tamiami virus(TAMV)RTPCR
塔那痘病毒PCR检测试剂盒Tanapox Virus(TPV)PCR
福赛斯坦纳菌PCR检测试剂盒Tannerella forsythiaPCR
跗线螨属通用PCR检测试剂盒Tarsonemus spp.PCR
桃拉综合症病毒PCR检测试剂盒Taura Syndrome Virus(TSV)PCR
马生殖泰勒氏菌PCR检测试剂盒Taylorella equigenitalisPCR
泰勒氏菌通用PCR检测试剂盒Taylorella spp.PCR
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文献和实验Nat Immunol：华中科技大学黄波团队揭示记忆性 T 细胞通过氨解毒促进记忆形成的机制
糖和脂肪酸氧化是生成 ATP 的主要来源。此外，氨基酸在脱氨基后也可以被氧化以提供或调节能量生成。然而，在细胞产生 ATP 的过程中，作为副产物的活性氧（ROS）和氨（NH3）也不可避免地产生，且这两种物质都具有细胞毒性，损害细胞寿命。因此，长寿细胞必须利用高效的机制来清除 ROS 和氨以延长存活时间。 在前面的研究中，课题组已经揭示了记忆 T 细胞如何清除 ROS，但是 CD8+ Tm 细胞是否能通过代谢清除有毒的氨仍然是未解之谜。氨基酸的脱氨基是细胞内氨的主要来源，主要通过两个步骤：第一
探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。活性氧检测试剂盒[9]。荧光法检测线粒体产生和释放的反应性氧化物（ROS）[10]。羟基自由基的检测（二羟苄胺DHBAs和水杨酸盐Salicylate）[11] ROS was evaluated by the staining of 2’，7’- dichlorofluorescein diacetate（二氯荧光乙酰乙酸盐）.ROS production
试剂盒 通过测定脂肪酸β氧化过程中的中间产物和关键酶，可以进一步探究机体内脂肪酸β氧化在能量产生、代谢调节、维持脂质平衡以及相关疾病调节机制等方面的作用。推荐使用索莱宝生化试剂盒：BC0645肉毒碱棕榈酰转移酶（CPI-Ⅰ）活性检测试剂盒、BC0670/BC0675游离肉碱/总肉碱含量检测试剂盒、BC0760/BC0765脂酰辅酶A合成酶（ACS）活性检测试剂盒、BC0775短链酰基辅酶A脱氢酶（SACD）活性检测试剂盒、BC0785中链酰基辅酶A脱氢酶（MACD）活性检测试剂盒、BC0795长链酰基
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