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人静脉内皮细胞/HUVEC

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  • 2025年12月15日
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      HUVEC

    • 库存

      T25/瓶

    • 细胞类型

      内皮细胞

    • 组织来源

      脐静脉

    • 相关疾病

      正常

    • 免疫类型

      提供免疫荧光鉴定报告

    • 运输方式

      活细胞包邮/冻存100-400元干冰费

    • 生长状态

      贴壁生长

    • 规格

      5×10^5

    培养瓶中贴壁细胞操作步骤

    对于贴壁培养的细胞,寄送前,我们会将培养基充满整个培养瓶 (运输培养基),以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。

    1. 收到细胞产品后,请及时核对培养瓶上标注的细胞名称与订 购的细胞名称是否一致,培养瓶是否有破损或漏液等异常情况。 将培养瓶置于倒置显微镜下仔细观察是否浑浊、是否细菌污染,有条件的情况下拍照并保存。因在运输过程中存在颠簸,且有些 细胞对温度变化也很敏感,可能存在一些细胞脱落漂浮的情况,这些细胞仍是活细胞,请勿丢弃,可离心富集后传代使用。如发现问题请及时联系售后。
    2. 如没有发现污染等异常情况,用70%酒精擦拭培养瓶表面后,将培养瓶放置37℃、5% CO2培养箱,静置1-2小时,镜下观察,若细胞汇合<90%,在生物安全柜环境中,去除培养瓶中的多余培养基,加入新鲜培养液5-8ml,随后将细胞置于 5%CO2 恒温培养箱中培养。如果细胞已经长满培养瓶,请立即传代。

    冻存细胞操作步骤:
    注意:为保证细胞的高存活率,请收到产品后,立即将细胞冻存管转入液氮并长期保存,直到需要复苏用于实验。使用Tissue culture treated 培养瓶或培养皿。
    1. 将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动,迅速解冻。为避免污染,确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速,大约2分钟。
    2. 一旦冻存管中液体融化后,立即取出,采用70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始,后续操作须在生物安全柜中完成。
    3. 将冻存管中的液体直接转移到含有9mL完全培养基的T25细胞培养瓶中。
    4. 将培养瓶置于37℃ 5% CO2培养箱培养
    5. 16小时后,将培养瓶中的培养基弃掉,更换新鲜的完全培养基继续培养。
     
    维持培养
    1. 从冷冻保存的细胞建立培养后的第二天更换新鲜培养基。
    2. 此后每三天更换培养基,直到培养皿内的细胞汇合约70%。
    3. 一旦培养的细胞达到70%汇合度,每隔一天更换培养基,直到细胞约90%汇合。
     
    细胞传代培养
    1.吸取并弃掉培养瓶中培养基, 加入PBS清洗2-3次,弃去。
    2.加入1 mL胰酶细胞消化液(0.05%胰酶+0.02% EDTA),并置于37 ℃培养箱中孵育1-2分钟,至细胞开始皱缩,细胞间隙增大,彼此分离,呈圆形。(此处为25cm^2培养瓶所用体积,可根据实际情况增减用量)。
    3.孵育期间准备一个15毫升离心管,加入2-3 完全培养基。
    4.将培养瓶中的胰酶消化液转移至15毫升离心管中,培养瓶继续置于培养箱中孵育,轻拍培养瓶直至所有的细胞脱落分离,向培养瓶中加入2ml完全培养基终止消化,并将脱落的细胞转移到15ml离心管中。
    5.检查是否成功收获细胞,在显微镜下观察培养瓶,查看残留下的细胞数量少于5%。
    6.将15ml离心管以1000rpm离心5分钟。弃上清,轻轻地将细胞重悬于新鲜的完全培养基中。
    7.将细胞转移至表面处理过的培养器皿中,置于37℃ 5% CO2培养箱培养。传代比例:建议收到细胞后的第一次传代比例为1:2,后期可1:3传代,也可根据实验需要进行传代。
     
    细胞冻存液:
    细胞冻存液,请使用产品: Cryo Frozen Medium(Cat#CTCC-002-002)离心收集细胞后,加入适量冻存液(每管细胞冻存量达到10的6次方),将冻存管放入冻存盒置于负80冰箱,24h后将冻存管转入液氮长期保存。
     
    细胞图:
    20250615_HUVEC P3_ch00.jpg20250620_HUVEC P4.jpg20250618001_HUVEC-P9-DAY1_ch00.jpg
     
    细胞鉴定图:
    微信图片_20250805105218.png微信图片_20250805105222.png微信图片_20250805105225.png微信图片_20250805105230.png微信图片_20250805105233.png微信图片_20250805105236.png

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      Liu X, Bai X, Liu H, Hong Y, Cui H, Wang L, Xu W, Zhao L, Li X, Li H, Li X, Chen H, Meng Z, Lou H, Xu H, Lin Y, Du Z, Kopylov P, Yang B, Zhang Y. LncRNA LOC105378097 inhibits cardiac mitophagy in natural ageing mice. Clin Transl Med. 2022 Jun;12(6):e908. doi: 10.1002/ctm2.908. PMID: 35758595; PMCID: PMC9235350.

      Cui X, Wang B, Han D, Cheng M, Yuan P, Du P, Hou Y, Su C, Tang J, Zhang J. Exacerbation of atherosclerosis by STX17 knockdown: Unravelling the role of autophagy and inflammation. J Cell Mol Med. 2024 May;28(10):e18402. doi: 10.1111/jcmm.18402. PMID: 39008328; PMCID: PMC11133389.

      Liao Y, Wang D, Gu C, Wang X, Zhu S, Zheng Z, Zhang F, Yan J, Gu Z. A cuproptosis nanocapsule for cancer radiotherapy. Nat Nanotechnol. 2024 Dec;19(12):1892-1902. doi: 10.1038/s41565-024-01784-1. Epub 2024 Sep 19. PMID: 39300223.

      Xing H, Peng H, Yang Y, Lv K, Zhou S, Pan X, Wang J, Hu Y, Li G, Ma D. Nitric oxide synergizes minoxidil delivered by transdermal hyaluronic acid liposomes for multimodal androgenetic-alopecia therapy. Bioact Mater. 2023 Oct 11;32:190-205. doi: 10.1016/j.bioactmat.2023.09.021. PMID: 37859688; PMCID: PMC10582348.

      Wang Z, Liu X, Ye T, Zhai Z, Wu K, Kuang Y, Ostrovidov S, Shao D, Wang Y, Leong KW, Shi X. 3D-printed perfused models of the penis for the study of penile physiology and for restoring erectile function in rabbits and pigs. Nat Biomed Eng. 2025 Mar 4. doi: 10.1038/s41551-025-01367-y. Epub ahead of print. PMID: 40038440.

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