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- M5901-1000
- 2025年12月25日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4ºC
- 保质期：
12
- 英文名：
VC-ECL Kit HRP
- 库存：
99
- 供应商：
上海逍鹏
- 规格：
1000ml
1. 溶液A：发光氨和增强剂
2. 溶液B：H2O2溶液
注：溶液A和溶液B规格一样。
【产品介绍】
| 货号 | 规格 | 储存条件 |
| 20-500-120 | 1200cm2(120ml) | 4°C |
| 20-500-BL | 500ml | 4°C |
| 20-500-BK | 1000ml | 4°C |
Thorpe和Kricka1,2提出此方法，在过氧化氢（H2O2）存在下，HRP催化环状二酰基酰肼（Cycle Diacylhydrazides）化合物的氧化，如发光氨（Luminol）。此时的发光氨处在激发状态，转变为基态时就会发出光，光发射的持续增强是由增强剂（Enhancers）产生，如酚类化合物。
【使用客户】
凡进行 Western，Northern和Southern Blot实验时，若有HRP标记的情况下，都可用此EZ-ECL试剂盒。
【使用方法】
准备
在暗室内准备以下仪器和溶液：
1.X光片盒；
2.X光片；
3.计时器；
4.显影剂、定影剂和水置于容器中；
5.玻璃移液管；
6.无菌手套：防止手与膜、X光片或试剂接触。
检测
1.将等体积的EZ-ECL Solution A溶液和EZ-ECL Solution B溶液混合，以制备足够的检测混合液（0.1ml/cm2），让检测混合溶液达到平衡至少需5分钟；
2.将印迹膜中多余洗液排出，但不可使膜干燥；
3.在膜上有核酸或蛋白质的一面加上检测混合液，室温孵育1-3分钟；
4.排出多余的检测混合液，并用保鲜膜将膜包裹好，轻柔地赶出其中的气泡；
5.将膜放在X光片盒中（有核酸或蛋白质的一面朝上），关掉暗室内的灯，用红色安全灯照明。在膜上铺一层X光片，关紧盒，暴光30-60秒；
6.换一张新的X光片，关紧盒暴光，此时得到第一张暴光片；
7.根据第一张暴光片的信号强弱，选择合适的时间暴光第二张底片；
8.如果信号过强，30分钟后再暴光。
注：检测混合液放置时间不宜超过一周，否则稳定性会降低。
【产品特点】
1.高灵敏度，无放射性的检测系统
2.高分辨率，同时线性范围广
3.可得到稳定的结果
4.仅需少量抗体
5.所需暴露时间短，检测即可完成
【相关产品】
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 储存 |
| EZ 阻断剂 EZ Block | 41-805-10 | 10g | AMB |
| EZ杂交溶液EZ-Hybridization Solution | 01-889-1B | 100ml | 4℃ |
【检测蛋白质的原理图】
【检测核苷酸的原理图】
【声明】
仅用于科研使用，不能用于临床诊断和治疗。
【说明书编制及修改日期】
2022年12月01
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文献和实验Ecl 显色原理：鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物，也可用作过氧化物酶的底物。在Ecl底物中，含有H2O2和鲁米诺，在HRP（辣根过氧化物酶）的作用下，发出荧光来。 试验步骤： 1）将两种显色底物1：1等体积混合（一般各1ml/membrane）。 2）将混合物覆盖在膜表面，1-2分钟，摇晃使均匀。 3）用保鲜膜把膜包起来，放入夹板中。 4）在暗室中将X光片，覆盖在膜的上面，夹好夹子，曝光1min。 5）显影、定影。 6）根据结果调整曝光时间和曝光区域，得到
Western blotting using ECL reagent
REAGENTSECL Western blotting kit (Amersham Life Science; cat# RPN2108): contains second antibodies for both mouse and rabbit, substrate and milk blocker (the milk blocker is not normally used when using ruminant samples).Hybond ECL nitrocellulose
【摘要】在辣根过氧化物酶/鲁米诺/增强剂/过氧化氢(HRP/luminol/enhancer/H2O2 )增强化学发光体系中，加入一系列辅助试剂，获得了一种灵敏度高、发光持续稳定、可长期贮存的新型酶促化学发光增强液。该增强液灵敏度为 2.4 amol/孔，发光半衰期为 40 min，工作液在室温可稳定存放 1 个月，在37 ℃下可稳定存放14 d。在此基础上，在TSH-BAS ECL EIA和 AFP ECL EIA上进行了应用。TSH-BAS ECL EIA测量范围为 0.17～35 mIU
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