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2年
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上海经科化学科技有限公司
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2-8℃
- 规格:
100ml
商品详情:
Opti-MEM® I 减血清培养基是一种经过改良的 Minimal Essential Medium (MEM),能够使胎牛血清添加量减少至少 50%,而生长速率或形态无变化。还推荐 Opti-MEM® I 培养基与阳离子脂质体转染试剂(如 Lipofectamine™ 试剂)配套使用。Opti-MEM® I 培养基可用于各种悬浮和贴壁的哺乳动物细胞,包括 Sp2、AE-1、CHO、BHK-21、HEK 和原代成纤维细胞。针对广泛的细胞培养应用,提供了多种组分的 Opti-MEM® I 改良培养基。
这种 Opti-MEM® I 的改良方式如下:
包含
•L-谷氨酰胺
• 酚红
完整配方保密。有关更多信息,请联系技术服务部。
Opti-MEM® I 培养基的使用
Opti-MEM® I 减血清培养基是一种内含胰岛素、转铁蛋白、次黄嘌呤、胸苷和微量元素的独特培养基。这些附加组分可使血清添加量减少至少 50%。Opti-MEM® I 培养基使用碳酸氢钠缓冲体系 (2.4 g/L),因此需要 5–10% CO2 的环境来维持生理 pH 值。
cGMP 生产和质量体系
Opti-MEM® I 在位于纽约格兰德岛上符合 cGMP 要求的工厂内生产。该工厂是在 FDA 登记的医疗器械生产商,且通过 ISO 13485 标准认证.为确保供应链的稳定,同时提供由苏格兰工厂生产的同等 Opti-MEM® I 产品 (31985-047)。该工厂亦是在 FDA 登记的医疗器械生产商,且通过 ISO 13485 标准认证。
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文献和实验一种应激状态,本来就长不好,这时候你投毒,当然更差。lipo2K不是不计较培养基是否有血清吗,所以在“双无”培养基稀释lipo2K 和RNA,形成复合物后可以投到含血清的无抗生素的培养基中。实际上我们转染用的培养基,double血清含量(普通5%,转染用10%)。早期lipo 的说明书要求“双无”,3hr后添加double血清培养基。实际操作发现,也可以直接投入double血清培养基中。 7.无抗生素的原因是,细胞膜被穿孔,抗生素进入直接杀细胞。 经验推荐:OPTI-MEM
靶基因的表达情况,或者细胞表型(phenotype)的变化,例如凋亡,周期,增殖,侵袭,转移等。那该怎么做呢? 一、准备 lipofectamine2000(转染试剂)(避光),Opti-MEMI 减血清培养基(避光),目的基因的质粒或者 siRNA(以 siRNA 为例),细胞,六孔板,培养基,以及一些细胞实验所需的普通物品。 二、步骤 细胞接种: 转染实验前天接种细胞,各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞密度应达到 60%~80% 覆盖。 细胞转染: 一般六孔
漂洗细胞2次,加入无血清基础培养基opti-MEM 1.5mL; 3. 将溶解后的siRNA稀释于250?l无血清的基础培养基opti-MEM中;取5-10ul脂质体混匀于250?l无血清的基础培养基opti-MEM中。静置5min; 4. 将脂质体稀释液及siRAN稀释液混合,轻轻混匀,室温放置20分钟; 5. 将脂质体-siRNA混合液加入细胞培养孔中; 6. 6小时后吸弃转染复合物,换入含10%胎牛血清的新鲜培养基; 7. 细胞在 CO2 培养箱中 37 ℃温育
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