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| 15-冠醚-5 | sigma | V900647-5G | 290.10 | Chemical Synthesis | 化学合成 | NDG | STD | 290.10 | 化学合成试剂 | reagent grade | 98% | 15-Crown-5 | 33100-27-5 | 774 | Chemical Synthesis - RC | C34 Chemical Synthesis | LR2 | Life Science Chemistry |
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文献和实验mmSupelco24C8涂渍柱分离C2-萘异构体,却无法使所有的异构体分离,Andress指出其原因可能是这种冠醚空腔大小与这些异构体不匹配。 小分子冠醚用作固定相存在高温易流失的缺点,且因不能在柱内壁形成稳定均匀的相膜而柱效不高,将小分子冠醚高分子化可以克服上述缺点。 4.2 聚硅氧烷类高分子冠醚固定相 Fine 1985年报道了将小分子冠醚在毛细管内形成高分子层的原位共聚法,他用聚乙烯苯并-15-冠-5(PVB15C5)涂渍玻璃内壁后,先经粗糙化,再用Carbowax-20M去活处理
加入1/10体积的ETR,颠倒7-10次后溶液变得浑浊,冰浴10-20min。 10. 42°C水浴5min后,25°C,3,000-5,000xg离心5min,ETR溶液将在管底形成蓝色分层。离心后,如果溶液中有大量的液滴悬浮,静置10分钟让液滴自然沉降。 11. 转移上清液移至离心管中,加入0.5倍体积无水乙醇(室温),混匀后室温静置1-2min。 12. 将HiBind® 中量柱装在15ml收集管中。转移20ml混合液至柱子內,室温下3,000-5,000xg离心
月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。 3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。 预期产量:1mg组织或1×106细胞提取RNA分别为: 肝和脾6-10μg,肾3-4μg,骨骼肌和脑组织1-1.5μg,胎盘1-4μg,上皮细胞8-15μg,成纤维细胞5-7μg 。 常见问题分析: 1. 得率低: ① 样品裂解或匀浆处理不彻底 ② RNA沉淀未完全溶解 A260/A280 ① 检测吸光度时
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