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- XY-sh0688
- 上海
- 2025年07月24日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
/
- 保质期：
3个月
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
50管/24样
分光光度法50T/24S
注 意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
植酸酶（phytase）是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸（盐）的一类酶的总称，属磷酸单酯水解酶，它能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷，降低粪便中的磷含量，减轻对环境的污染，改善营养成分的吸收和利用，因此具有极其广泛的研究和应用价值。
测定原理：
植酸酶在一定温度和pH值条件下，水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物，无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物，在700nm处有特征吸收峰，根据700nm处吸光值变化可计算得植酸酶活性。
自备实验用品及仪器：
天平、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅，甲苯（不允许快递）。
试剂的组成和配制：
缓冲液：液体60mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，4℃避光保存，临用前加缓冲液30mL配制，现用现配；用不完的试剂4℃保存一个月。
试剂二：液体30mL×1瓶，4℃保存。
显色剂：粉剂×6瓶，4℃避光保存，临用前根据用量每瓶加1mL双蒸水溶解，再加4mL试剂二混匀。
样本处理：
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过30~50目筛。
测定操作表：
| 对照管 | 测定管 | |
| 样本（g） | 0.06 | 0.06 |
| 甲苯 | 40 | 40 |
| 振荡混匀，室温放置15min | ||
| 缓冲液（µL） | 1000 | |
| 试剂一（µL） | 1000 | |
| 混匀，37℃孵育24h，10000g，4℃离心5min，取上清 | ||
| 上清 | 500 | 500 |
| 显色剂（µL） | 500 | 500 |
| 混匀，静置15min，测定700nm处吸光值，△A=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。 | ||
酶活性计算公式：
标准曲线：y = 1.759x + 0.0084，R2 = 0.9977；x为标准品浓度（μmol/mL），y为吸光值△A。
酶活性定义：在37℃，pH5.5的条件下，每克土样每小时从5mmol/L的植酸钠溶液中释放出1μmol的无机磷为一个酶活力单位。
植酸酶活性（μmol/h /g 土样）=（△A-0.0084）÷1.759×V反总÷W÷T
=0.41×（△A-0.0084）
V反总：反应总体积，1.04mL；T：反应时间，24h；W：样本质量，0.06g。
注意事项：
1、显色剂需要临用前根据用量配制，每一瓶是5个样本的用量，新配制的显色剂若有颜色则已经污染或者试剂过期，应放弃使用。
2、ΔA线性范围为0.01-1。
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文献和实验这周讨论一项常用的技术，即使常用但仍引起部分人核酸分离焦虑症。那就是基因组DNA的纯化去杂质。 场景是这样的：你有一份采自南太平洋中部一个偏僻小岛上首次发现的古老兰花品种根际土壤样品。你使用了非PowerSoil Kit法提取其中的微生物DNA。最终DNA含有太多杂质，无法PCR扩增。因此需要去除腐植酸等PCR抑制因子。你需要所有的核酸分子通过全基因组鸟枪测序……怎么办？ 你致电MO BIO说了你的大概情况，而我们推荐了使用PowerClean Kit
管（2ml、5ml、10ml），高速台式离心机，分光光度计，微量进样器，荧光灯（反应试管处光照强度为4000lx）；刻度吸管，G3垂熔玻璃漏斗等。 二、方法步骤 （一）田间直接鉴定 当土壤干旱来临时，尤其在小麦孕穗至灌浆阶段发生旱性时，植株因失水而逐渐萎蔫，叶片变黄并干枯。在午后日照最强、温度最高的高峰过后根据小麦叶片萎蔫程度分5级记载。级数越小，抗旱性越强。 “1”级 无受害症状； “2”级 小部分叶片萎缩，并失去应有光泽
列的质量评估工作，证明了提取环境样品DNA的过程中使用IRT技术的重要性。一篇总结性文章曾发表于ASM 2010年年会（可致电：0755-8348 9872索取）。使用含IRT技术的MO BIO PowerSoil® DNA Isolation Kit，与不含IRT技术的竞争品牌试剂盒，提取0.1g堆肥做对比试验。最终DNA用分光光度法和凝胶电泳分析作初步分析，然后用通用引物16S rRNA，KAPA2G Fast HotStartReadymix酶跑end-point PCR。下图（图3A）展示
