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100
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/
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3个月
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
详见说明书
- 规格:
50管/24样
试剂盒说明书
分光光度法50管/24样
注 意 :正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,ACX一般分离自耐酸的真菌,细菌及部分霉菌。
测定原理:
ACX在酸性环境下能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,进一步在沸水浴条件下与3,5-二硝基水杨酸发生显色反应,在540nm处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在540nm吸光值增加速率,可计算ACX活力。
自备实验用品及仪器:
天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅,可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿。
试剂组成和配制:
缓冲液:液体20mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体5mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体25mL×1瓶,4℃避光保存。
样品处理:
新鲜土样风干,过30-50目筛。
测定操作表:
| 对照管 | 测定管 | |
| 土样(g) | 0.1 | 0.1 |
| 缓冲液(μL) | 600 | 400 |
| 试剂一(μL) | 200 | |
| 混匀,50℃震荡反应30min,立即90℃水浴10min,8000g,25℃离心10min,取上清500μL | ||
| 试剂二(μL) | 500 | 500 |
| 混匀,90℃水浴中显色5min,1mL玻璃比色皿,对照管调零,测定A540。 | ||
S-ACX计算公式:
标准曲线:y = 2.5554x - 0.002 ,R2 = 0.9983
酶活定义:50℃,pH4.8条件下,每克土壤每天分解木聚糖产生1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。
S-ACX活力(μmol/d/g 土样)=(A540+0.002)÷ 2.5554×V反总×103÷ W÷T÷ 150
= 75.14×(A540+0.002)÷ W
V反总:反应总体积,0.6mL;T:反应时间,1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150:木糖分子量。
注意事项:
1. 保证震荡反应30min,使酶与底物充分接触。
2. 注意90℃水浴防止爆开,以免改变反应体系。
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文献和实验佚名 第一节 概论 线虫隶属线形动物门的线虫纲(Class Nematoda),是无脊椎动物中一个很大的类群,不但种类多,而且数目也极大,估计全球约有1万余种。大多数线虫营自生生活,广泛分布在淡水、海水、沙漠和土壤等自然环境中;营寄生生活的只是其中很少的种类,常见的寄生于人体并能导致严重疾患的线虫约有10余种。重要的有蛔虫、钩虫、丝虫、旋毛虫等。
,萃取于纤维上的分析物用甲醇静态解析法解析后可用HPLC-UV 系统进行测定,该测定方法的检测限为3.3 ng/mL 。Reyzer 等[36 ] 使用50μm CW-TPR 和65μm PDMS-DVB 涂层纤维萃取了水样中的除草剂阿维菌素B1和伏蚁腙,并与HPLC-MS 结合建立了这两种物质的分析方法,该方法的检测限在0.1 ―1.0 ng/mL 之间。Moder 等[37] 使用50μm CW-TPR 涂层纤维从土壤浸提液中萃取了几种阿特拉津,并与HPLC-MS结合对该样品进行了测定,该方法
物质常用的离子对试剂为烷基磺酸盐,如戊烷磺酸钠、辛烷磺酸钠等。另外高氯酸、三氟乙酸也可与多种碱性样品形成很强的离子对。 分析酸性物质常用四丁基季铵盐,如四丁基溴化铵、四丁基铵磷酸盐。 离子对色谱法常用ODS柱(即C18),流动相为甲醇-水或乙腈-水,水中加入3~10 mmol/L的离子对试剂,在一定的pH值范围内进行分离。被测组分保时间与离子对性质、浓度、流动相组成及其pH值、离子强度有关。 5.排阻色谱法 固定相是有一定孔径的多孔性填料,流动相是可以溶解样品的溶剂。小分











