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土壤酸性木聚糖酶测试盒/土壤酸性半纤维素酶测试盒(可见分光光

度法)
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  • XY-sh0634
  • 上海
  • 2025年07月24日
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      3个月

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 保存条件

      详见说明书

    • 规格

      50管/24样

    土壤酸性木聚糖酶(Soil Acidic XylanaseS-ACX)测定
    试剂盒说明书
    分光光度法50/24

        正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
    测定意义
    木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,ACX一般分离自耐酸的真菌,细菌及部分霉菌。

    测定原理
    ACX在酸性环境下能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,进一步在沸水浴条件下与3,5-二硝基水杨酸发生显色反应,在540nm处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在540nm吸光值增加速率,可计算ACX活力。

    自备实验用品及仪器
    天平、温离心机、震荡仪、恒温水浴锅,可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿。

    试剂组成和配制
    缓冲液液体20mL×14保存。
    试剂一:液体5mL×14℃避光保存。
    试剂二:液体25mL×14避光保存。

    样品处理:
    新鲜土样风干,过30-50目筛。

    测定操作表
     
      对照管 测定管
    土样g 0.1 0.1
    缓冲液μL) 600 400
    试剂一μL   200
    混匀,50℃震荡反应30min,立即90℃水浴10min8000g25℃离心10min,取上清500μL
    试剂二μL 500 500
    混匀,90℃水浴中显色5min1mL玻璃比色皿,对照管调零测定A540

    S-ACX计算公式
    标准曲线:y = 2.5554x - 0.002 R2 = 0.9983

    酶活定义:50℃,pH4.8条件下,每克土壤每天分解木聚糖产生1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。
    S-ACX活力(μmol/d/g 土样)=(A540+0.002)÷ 2.5554×V反总×103÷ W÷T÷ 150
                          = 75.14×A540+0.002)÷ W
    V反总:反应总体积,0.6mLT:反应时间,1/48d10001mmol/L =103μmol/L150:木糖分子量。


    注意事项
    1. 保证震荡反应30min,使酶与底物充分接触。
    2. 注意90℃水浴防止爆开,以免改变反应体系。
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