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食品中亚硝酸盐含量测试盒(微量法)

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  • 上海
  • 2025年07月14日
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      100

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    • 保质期

      3个月

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 保存条件

      详见说明书

    • 规格

      100管/96样

    食品中亚硝酸盐含量测定试剂盒说明书
     微量法100T/96S


    注    意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
    测定意义:
    在食品中,亚硝酸盐可与肉品中的肌红素结合而更安定,在食品加工业中作为保色剂,以维持肉制品的良好外观,并防止肉毒梭状芽孢杆菌的产生,提高食用肉制品的安全,但是人体长期摄入亚硝酸盐过量的食品,可诱发消化系统癌变。

    测定原理:
    在酸性条件下,亚-硝-酸盐与对氨-基-苯-磺酸反应生成重氮化合物,再与N-1-萘基乙-二胺形成紫红色偶氮化合物,在540nm处有特征吸收峰。

    自备实验用品及仪器:
    天平、研钵或匀浆器、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。

    试剂组成和配制:
    提取液一:液体50 mL×1瓶,室温保存。
    提取液二:液体50 mL×1瓶,室温保存。
    提取液三:液体50 mL×1瓶,室温保存。
    粉剂四:粉剂 100 mg ×1支,室温保存。
    试剂一:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。
    试剂二:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。

    样品处理:
    称取样品约0.2g鲜重或0.05g干重,破碎,加入0.5 mL 提取液一,沸水浴15min,冷却至室温,加入0.5 mL提取液二,震荡摇匀,加0.5 mL 提取液三,用镊子加少量粉剂四(约1 mg),静置30min25℃,8000g离心15 min,取上清液待测。

    测定步骤和操作表:
    1. 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至540nm,蒸馏水调零。
    2. 操作表
      测定管 空白管
    蒸馏水(µL   70
    样品(µL 70  
    试剂一(µL 65 65
    试剂二(µL 65 65
    混匀,25℃静置15min于微量石英比色皿/96孔板中检测540nm处吸光值A   
     A=A测定 - A空白

    注意:空白管只需测定一次。

    亚硝酸盐含量计算:
    1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
    标准曲线回归方程为:y=0.234x + 0.0002R2= 0. 999  x为标准品亚-硝-酸钠浓度(μg/ml y为吸光值A
    NO2-(μg/g=(△A-0.0002÷0.234×V÷V÷V样总×W×0.6668
                         =A – 0.086÷0.234×1.5×0.6668÷W
                         =4.27×(△A-0.0002÷W
    V样总:加入提取液体积,1.5 mL V样:反应中样品体积,0.07mLW:样品质量,g
    b.96孔板测定的计算公式如下
    标准曲线回归方程为:y=0.141x +0.095R2= 0. 9991  x为标准品亚-硝-酸钠浓度(μg/ml y为吸光值A 
    NO2-(μg/g =(△A-0.0002÷0.141×V÷V÷V样总×W×0.6668
                        =(△A-0.0002÷0.141×1.5×0.6668÷W
                        =7.09×(△A-0.0002÷W
    V样总:加入提取液体积,1.5 mL V样:反应中样品体积,0.07mLW:样品质量,g
    注意事项:
    1. 试剂盒2-8保存。
    2. 试剂对人体有一定的危害,请穿实验服,戴手套操作。
    3. 若检测出得OD值在标准曲线范围外,请将样品进行适当的浓缩或稀释(A540 <0.09浓缩,A540 > 1.5 适当稀释)。
    4. 最低检出限为0.5μg/g
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