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总生物碱含量测定试剂盒

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  • ￥440
  • wksubio
  • WS50010F
  • 国内
  • 2025年09月25日
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    • 英文名：

      Total alkaloid content determination kit

    • CAS号：

      WS5010F

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    总生物碱含量测定试剂盒说明书
    （货号：WS5010F 分光法 48 样）
    一、产品简介：
    生物碱是存在于生物体内的含氮有机化合物，大多数存在于植物中，目前已分离到三千
    余种，其中近百种具有很强的生理活性，广泛应用于临床医疗。
    利用生物碱与溴甲*绿反应生成黄色物质，该物质在 415nm 有特征吸收峰，通过检测
    415nm 的增加量即可得出样本中总生物碱含量。
    二、试剂盒组分与配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    提取液
    液体 1.5mL×1 支
    4℃保存 临用前按照二氯*烷
    ：甲醇：提取液
    (试
    剂盒提供
    )以 40:10:1 的比例混匀
    ，备用
    。
    试剂一
    A：粉体 mg×1 支
    B：液体 2mL×1 支
    4℃保存
    试剂二
    液体 23.5mL×1 瓶
    4℃保存
    标准品
    粉体 mg×1 支
    4℃保存
    若重新做标曲，则用到该试剂。
    三、所需的仪器和用品：
    可见分光光度计、1mL 石英比色皿（光径 1cm）、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移
    液器、二氯*烷、甲醇。
    四、总生物碱含量的测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本制备：
    样本经 60℃烘干，打碎过筛，取 0.05 g 过筛后样本至 2mLEP 管中，加入 1mL 提取液，
    室温震荡提取 30 min，超声提取 30 min（间隔 3min 拿出震荡 1min 再继续超声）；最终
    用提取液补足至 1mL 液面位置，然后室温 4000rpm 离心 10min，取上清液测定。
    2、上机检测：
    ① 可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 415nm，蒸馏水调零。
    ② 临用前配置工作液：取 1.5mL 试剂一 B 液至 A 中，混匀完全溶解。再全部转移至试剂
    二中，混匀备用。在 EP 管中依次加入：
    试剂名称（
    μL）
    测定管
    空白管（仅做一次）
    样本
    100
    二氯*烷
    1000
    1100
    蒸馏水
    500
    500
    工作液
    200
    200
    上下震荡（手动）5min，室温（25℃）静置 30min，快速取下层 700μL 澄
    清液体至 1mL 石英比色皿（光径 1cm），于 415nm 处快速读取吸光值 A，
    △A=A 测定-A 空白。
    【注】：1. 若△A 差值低于 0.01，可增加样本取样质量 W 或加大样本体积 V1（如增至 300μL，
    则二氯甲%相应减少），则改变后的 W 和 V1 需代入计算公式重新计算。
    2. 若 A 测定大于 1，可对样本上清用二*甲烷稀释，则稀释倍数 D 代入公式计算。本试剂盒仅供科研使用
    2
    五、结果计算：
    1、标准曲线方程：y = 0.0404x + 0.0084；x 为标准品质量（
    μg）；y 为△A。
    2、按照样本质量计算：
    总生物碱含量(μg/g 重量)=[(△A-0.0084)÷0.0404]÷(W×V1÷V)×D
    =247.5×(△A-0.0084)÷W×D
    V---提取液的总体积，1mL；
    V1---加入反应体系样本体积，0.1mL；
    W---样品质量，g；
    D---稀释倍数，未稀释即为 1。
    附：标准曲线制作过程：
    1 制备标准品母液（500μg/mL）：向标准品 EP 管中加入 1mL 二氯甲*溶解。
    2 把母液用二氯*烷稀释成以下浓度梯度的标准品：0，40，80，120，160，200μg/mL。
    也可根据实际样本来调整标准品浓度。
    3 依据测定管的加样表操作，根据结果即可制作标准曲线。

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