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- 2025年09月02日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Mycoplasma hominis PCR Kit
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50次
英文名称：Mycoplasma hominis PCR Kit
支原体（mycoplasma）是 1898 年 Nocard 等发现的一种类似细菌但不具 有胞壁的原核微生物，能在无生命的人工培养基上生长繁殖，直径 50-300nm， 能通过细菌滤器。又称霉形体，为目前发现的最小的最简单的原核生物，支原 体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞，原核细胞的细胞器只 有核糖体)。基因组多为双链 DNA，散布于整个细胞内没有形成的核区或拟核。 与泌尿生殖道感染有关的主要是分解尿素支原体和人型支原体两种，约有 20-30%的非淋菌性尿道炎的病人，是由以上两种支原体引起的，是非淋菌性 尿道炎及宫颈炎的第二大致病菌。因此对支原体进行快速灵敏的诊断具有重要 的意义。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的产品。
产品特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增支原体 DNA，但跟其他微生物无交 叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次。
6. 本产品只能用于科研。
人支原体PCR试剂盒包装规格及成分：
| 编号 |
成分 |
规格 |
| 试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
| 试剂二 |
超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
| 试剂三 |
人支原体 PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂四 |
人支原体 PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） |
| 试剂五 |
使用手册 | 1 份 |
运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。
自备试剂：DNA 模板
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求 的样品起始量）中加 10μL人支原体 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液 而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰 上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
| 成分 | N+2 个 样品管 | PCR 阴性 对照 | PCR 阳性 对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 人支原体 PCR 引物 混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
| PCR 阴性对照（水） | 18 μL | ||
| PCR 阳性对照（人支原体 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液） | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应 （35 个循环） | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 30 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、电泳检测 5. 取 10-20 μL PCR 产物。1%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排 除 PCR 抑制剂的感染。
人支原体PCR试剂盒相关产品：
| 产品名称 |
方法 |
产品规格 |
价格 |
| 人支原体LAMP试剂盒 | LAMP |
50次 |
2490 |
| 人支原体PCR试剂盒 | PCR |
50次 |
1990 |
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50次 |
2490 |
| 人支原体探针法荧光定量PCR试剂盒 | 探针法 |
50次 |
2990 |
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