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- 2025年09月01日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Thymidine Kinase Gene (TK) Koi Herpesvirus(KHV) PCR Kit
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50次
英文名称：Thymidine Kinase Gene (TK) Koi Herpesvirus(KHV) PCR Kit
锦鲤疱疹病毒（Koi herpesvirus），简称 KHV。因其主要是由 DNA 类 疱疹滤过性病毒感染所引起，又名鲤鱼肾炎及鳃坏疽病毒，亚洲地区于 2004 年也被报导感染锦鲤疱疹病毒。我国将其列为二类动物疫病，是世界动物卫生 组织（OIE）必须申报的疾病。因此对锦鲤疱疹病毒进行快速灵敏的诊断具有重 要的意义。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的产品，针对对胸苷激酶 基因(TK)进行 PCR 检测。
产品特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据锦鲤疱疹病毒TK基因保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
锦鲤疱疹病毒TK基因PCR试剂盒包装规格及成分：
| 编号 |
成分 |
规格 |
| 试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
| 试剂二 |
超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
| 试剂三 |
锦鲤疱疹病毒TK基因PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂四 |
锦鲤疱疹病毒TK基因 PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） |
| 试剂五 |
使用手册 | 1 份 |
运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。
自备试剂：DNA 模板
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求 的样品起始量）中加 10μL 锦鲤疱疹病毒TK基因 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液 而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰 上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
| 成分 | N+2 个 样品管 | PCR 阴性 对照 | PCR 阳性 对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 锦鲤疱疹病毒TK基因 PCR 引物 混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
| PCR 阴性对照（水） | 18 μL | ||
| PCR 阳性对照（锦鲤疱疹病毒TK基因 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液） | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应 （35 个循环） | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 30 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、电泳检测 5. 取 10-20 μL PCR 产物。1%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排 除 PCR 抑制剂的感染。
锦鲤疱疹病毒TK基因PCR试剂盒相关产品：
| 产品名称 |
方法 |
产品规格 |
价格 |
| 锦鲤疱疹病毒TK基因LAMP试剂盒 | LAMP |
50次 |
2490 |
| 锦鲤疱疹病毒TK基因PCR试剂盒 | PCR |
50次 |
1990 |
| 锦鲤疱疹病毒TK基因染料法荧光定量PCR试剂盒 | 染料法 |
50次 |
2490 |
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50次 |
2990 |
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文献和实验基因机能营救 function rescue by gene
指对因某基因产生变异而引起异常的细胞，人为地引入具有正常机能的基因，恢复其表现形质而言。例如使在胸腺嘧啶脱氧核苷激酶基因缺陷（ tK- ）的小白鼠 L细胞，吸收疱疹病毒分离出的胸苷激酶基因与磷酸钙凝胶的混合物，表现形质转换成 tK＋ ，此时一般认为引入的基因是在细胞中加合起来的，而不是用正常基因靠遗传的重组来代换有缺陷的基因。
性的进展，单纯疱疹病毒1型(HSV-1)基因组的全序列已经弄清，对HSV基因编码蛋白作用与功能有了更多的了解. (一)HSV基因结构研究进展 HSV基因组为一线性DNA分子，由共价连接的长片段(L)和短片段(S)组成，每一片段均含有单一序列和反转重复序列，长重复序列(RL)和短重复序列(Rs)中含有命名的为a的末端重复序列，由约400碱基对(bp)组成，在L和S片段之间，插有a的反转重序列，称为a'.由于L和S片段连接的方式不同，HSV的DNA共有4种同分异构体.HSV-117syn株
。pRL-TK载体pRL-TK （图9），在Rluc上游含有单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶 （HSV-TK） 的启动子区域。HSV-TK启动子在胚胎和成熟的哺乳组织细胞中，可低水平和组成型地表达。pRL-SV40载体pRL- SV40含SV40早期增强子/启动子区域，在多种细胞中，可高强度、组成型表达Rluc。载体pRL-40还含有SV40的复制起始区，在诸如COS-1或COS-7细胞中，可瞬时、附加体式地复制，表达SV40大抗原。pRL-CMV载体pRL-CMV含CMV早早期增强子/启动子区域， 在多种
