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BeyoMag™磁珠法mRNA纯化试剂盒

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  • ¥259 - 2658
  • 碧云天(beyotime)已认证
  • R0071
  • 2025年09月21日
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      50次/200次/800次

    规格:50次产品价格:¥259.0
    规格:200次产品价格:¥826.0
    规格:800次产品价格:¥2658.0

    碧云天的BeyoMag™磁珠法mRNA纯化试剂盒(BeyoMag™ mRNA Purification Kit with Magnetic Beads)是一种使用Oligo (dT)25包被的磁珠,配合优化的缓冲体系,用于稳定、高效、便捷地从总RNA中快速分离纯化出高纯度完整mRNA的试剂盒。

    本试剂盒纯化的mRNA可直接应用于RT-PCR、qPCR、高通量测序、mRNA文库的构建、固相cDNA文库构建、Northern blot分析、RACE等分子生物学实验,还可用于mRNA疫苗的研发等[1-2]。

    一个典型的哺乳动物细胞中,四种主要的大分子的质量和占比为:RNA, ∼20pg (1%); DNA, ~7pg (0.3%); protein, ∼500pg (20%); polysaccharide (多糖), ∼2μg (78.7%)。信使RNA (messenger RNA, 简称mRNA) 约占总RNA质量的4%,核糖体RNA (ribosomal RNA, 简称rRNA)约占80% [3]。

    本试剂盒的原理和主要操作流程如图1所示。BeyoMag™ Oligo (dT)25磁珠表面共价修饰了25聚dT序列即Oligo (dT)25,当真核细胞、动植物组织抽提的总RNA与BeyoMag™ Oligo (dT)25磁珠混合后,磁珠表面的寡聚dT序列与mRNA 3'端的poly(A)进行碱基配对而特异性结合,然后在外界磁场的作用下,磁珠与相应溶液可以快速而高效地分离,经洗涤充分去除杂质,最后用洗脱液将mRNA从磁珠上洗脱下来,即可获得高纯度完整mRNA[4-5]。

    产品细节图片1

    图1.BeyoMag™磁珠法mRNA纯化剂盒(R0071)的工作原理示意图。

    本试剂盒具有提取效果稳定、纯度高、速度快、操作便捷等优点。本试剂盒的mRNA提取体系经过反复测试和优化,能分离纯化获得总RNA中90%以上的mRNA。仅需孵育、洗涤、洗脱等简单的操作,整个纯化过程不超过15分钟即可完成。所有操作都在同一个离心管中完成,操作便捷。细胞中提取的total RNA使用本产品进行mRNA的纯化效果参考图2。

    产品细节图片2

    图2.BeyoMag™磁珠法mRNA纯化试剂盒(R0071)用于从总RNA纯化mRNA的效果图。使用RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式) (R0024)抽提293T细胞的总RNA,再使用本产品进行mRNA的纯化,然后使用BeyoFast™ SYBR Green One-Step qRT-PCR Kit (D7268)进行qRT-PCR检测,使用Actin、B2M和GAPDH三种内参引物对比总RNA (Total RNA)和纯化的mRNA的Ct值。图中可见mRNA纯化前后的Ct值基本一致,说明mRNA的纯化效果接近100%。实际结果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

    本试剂盒中的BeyoMag™ Oligo (dT)25磁珠粒径约为200nm,浓度约为5mg/ml。每毫克磁珠偶联的Oligo (dT)25约为300-400pmol,每毫克磁珠可纯化约2-3µg mRNA。

    对于常规的mRNA纯化,按照每个样品使用20μl磁珠悬浊液,本试剂盒小包装可用于50次mRNA纯化,中包装可用于200次mRNA纯化,大包装可用于800次mRNA纯化。

    包装清单:
    产品编号 产品名称 包装
    R0071S-1 BeyoMag™ Oligo (dT)25磁珠 1ml
    R0071S-2 溶液I (结合液) 30ml
    R0071S-3 溶液II (洗涤液) 25ml
    R0071S-4 溶液Ⅲ (洗脱液) 2ml
    说明书 1份
     
    产品编号 产品名称 包装
    R0071M-1 BeyoMag™ Oligo (dT)25磁珠 4ml
    R0071M-2 溶液I (结合液) 120ml
    R0071M-3 溶液II (洗涤液) 100ml
    R0071M-4 溶液Ⅲ (洗脱液) 8ml
    说明书 1份
     
    产品编号 产品名称 包装
    R0071L-1 BeyoMag™ Oligo (dT)25磁珠 16ml
    R0071L-2 溶液I (结合液) 480ml
    R0071L-3 溶液II (洗涤液) 400ml
    R0071L-4 溶液Ⅲ (洗脱液) 32ml
    说明书 1份
    保存条件:

    4℃保存,一年有效。其中BeyoMag™ Oligo (dT)25磁珠长期不使用时,可以-20℃保存,-20℃可以保存更长时间。

    注意事项:

    操作过程要严格保证无RNA酶和DNA酶污染。对于操作环境中RNase的去除,推荐使用碧云天生产的RNase and DNase Away (R0123)以去除实验桌面上或其它接触面上的RNase。

    本产品的所用试剂和耗材都要求是RNase-free和DNase-free的,操作时应小心,避免被污染。如果耗材可能有RNase污染,可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜,然后高温高压灭菌并烘干。如果可能有DNase污染,通常高温高压灭菌可以使DNase灭活。

    需自备磁分离装置,推荐使用碧云天的BeyoMag™磁分离架系列产品(FMS004FMS008FMS012FMS016FMS024)。

    分装或使用磁珠时,请适当涡旋震荡或反复颠倒以确保磁珠充分混匀。

    磁分离前应适度震荡离心管使磁珠充分分散后再靠近磁场。如果出现磁珠挂壁现象,可以在磁珠聚集后晃动管内液体,使挂壁的磁珠流下。

    请使用推荐的总RNA量。如果总RNA量过大,可能造成磁珠聚集,会影响洗涤进而影响提取获得的mRNA纯度。发生磁珠聚集时,洗涤时需尽量分散磁珠,这样可有效改善提取效果。如果发生磁珠聚集现象,建议在后续实验中适当减少总RNA量。

    由于RNA容易降解,提取获得的mRNA推荐尽快用于RT-PCR等后续实验。如果不能尽快使用,需要-80℃保存。

    本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。

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