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羟自由基清除能力试剂盒

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  • ￥470
  • wksubio
  • WS5210F
  • 国内
  • 2025年11月18日
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    • 英文名：

      Hydroxyl Radical Scavenging Ability Kit

    • CAS号：

      WS5210F

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    羟自由基清除能力试剂盒说明书
    (货号：WS5210F 分光法 48 样)
    一、产品简介：
    Fenton反应是最常见的产生羟自由基的化学反应，H2O2的量和Fenton反应产生的OH·量
    成正比，Fenton 反应生成的羟自由基与水杨酸反应，生成物在 510nm 处有特殊吸收。采
    用固定反应时间法，根据测试物在 510nm 处吸光度值的大小来判断测试物清除羟自由基
    的能力。
    二、试剂盒的组分与配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    试剂一
    粉体 mg×4 支
    4℃保存
    临用前甩几下使试剂落入底部，再
    加 4mL 蒸馏水溶解备用。
    试剂二
    粉体×4 瓶
    4℃保存
    临用前甩几下使试剂落入底部，再
    加 4mL 无水乙醇，充分溶解备用。
    试剂三
    液体×1 支
    4℃保存
    临用前甩几下或离心使试剂落入
    底部，取 80μL 至新的容器中，再
    加 8mL 蒸馏水溶解备用。
    三、所需的仪器和用品：
    可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、天平、水浴锅、离心机、研钵、可调
    式移液器、冰、蒸馏水。
    四、羟自由基清除能力测定：
    建议选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！
    1、样本制备：
    ① 组织样本：称取 0.1g 样本（若是干样可取 0.02-0.05g），加入 1mL 的 80%乙醇（自备）
    进行匀浆，匀浆后转入 2mL 离心管中；于 50℃，200-300W 条件下超声提取 30min（间
    隔 5min 振荡混匀一次）。若有损耗需用 80%乙醇定容至 1mL，12000rpm 室温离心
    10min，取上清待测。
    ② 液体样本：直接检测。若浑浊，离心后取上清检测。
    2、上机检测：
    ① 分光光度计预热 30min，调节波长至 510nm，蒸馏水调零。
    ② 不同样本清除能力不一，可先选取 2 个样本做检测，若 A 测定-A 对照接近零，需对样
    本进行稀释（用提取液稀释）后再检测，或降低样本加样量（如减至 60μL，蒸馏水相
    应增加）。
    ③ 在 EP 管中依次加入：
    试剂名称（
    μL）
    测定管
    对照管
    空白管（仅做一次）
    试剂一
    125
    125
    125
    试剂二
    125
    125
    125
    样本
    125
    125
    蒸馏水
    500
    625
    625
    试剂三
    125
    125
    混匀，37℃反应 20min（准确时间），若测定管和对照管有浑浊
    现象，可于 8000rpm 室温下离心 5min，取全部澄清液体转移至
    1mL 玻璃比色皿中，立即于 510nm 处读取各管吸光值 A。本试剂盒仅供科研使用
    混匀，37℃反应 20min（准确时间），若测定管和对照管有浑
    浊现象，可于 8000rpm 室温下离心 5min，取 200μL 澄清液体
    转移至 96 孔板内，立即于 510nm 处读取各管吸光值 A。
    【注】1. 加完试剂三后反应开始启动。
    2. 若 A 测定-A 对照的差值与空白管接近，可增加样本加样量（如由 125μL 增至 250μL，
    蒸馏水相应减少）；
    五、结果计算：
    羟自由基清除率(%)=[A 空白-(A 测定-A 对照)]÷A 空白×100%
    2

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