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- 2025年08月27日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Heterakis isolonche
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50次
英文名称：Heterakis isolonche
荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术，它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。为此本公司开发了简单快捷的自然感染雉异刺线虫PCR试剂盒。
产品特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据自然感染雉异刺线虫保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
自然感染雉异刺线虫PCR试剂盒包装规格及成分：
| 编号 |
成分 |
规格 |
| 试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
| 试剂二 |
超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
| 试剂三 |
自然感染雉异刺线虫 PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂四 |
自然感染雉异刺线虫 PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） |
| 试剂五 |
使用手册 | 1 份 |
运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。
自备试剂：DNA 模板
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求 的样品起始量）中加 10μL 自然感染雉异刺线虫 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液 而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰 上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
| 成分 | N+2 个 样品管 | PCR 阴性 对照 | PCR 阳性 对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 自然感染雉异刺线虫 PCR 引物 混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
| PCR 阴性对照（水） | 18 μL | ||
| PCR 阳性对照（自然感染雉异刺线虫 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液） | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应 （35 个循环） | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 30 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、电泳检测 5. 取 10-20 μL PCR 产物。1%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排 除 PCR 抑制剂的感染。
自然感染雉异刺线虫PCR试剂盒相关产品：
| 产品名称 |
方法 |
产品规格 |
价格 |
| 自然感染雉异刺线虫LAMP试剂盒 | LAMP |
50次 |
2490 |
| 自然感染雉异刺线虫PCR试剂盒 | PCR |
50次 |
1990 |
| 自然感染雉异刺线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 染料法 |
50次 |
2490 |
| 自然感染雉异刺线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 探针法 |
50次 |
2990 |
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文献和实验，产未受精卵，使自然种群逐渐减少。在遗传防制中，有辐射、化学杂交不育、胞质不亲和、染色体易位等方法。目前还在研究和小规模现场试验，推广应用尚待努力。 五、病媒节肢动物的判断 1．生物学的证据 ①与人的关系密切，必须刺吸人血，或舐吸人的食物；②数量较多，往往是当地的优势种或常见种类；③寿命较长，能保持病原体完成发育和增殖所需的时间。 2．流行病学证据 其地理分布及季节消长与某种虫媒病流行地区以及流行季节相一致。 3．自然感染的证据
，有一对短粗交合刺，相等同型，末端有小钩。雌虫大小为5.5～6.5×0.07mm，尾端呈锥形，阴门位于虫体后1／6处，子宫内含虫卵5～16个。虫卵长圆形,无色透明，大小为80～100×40～47µm，似钩虫卵而略长，直径一般超过横径2倍以上, 一端较圆，另一端较尖，一侧常较另一侧稍隆起。卵壳很薄，卵膜密接于卵壳内面，但在两端可见空隙，尤以尖细端明显。新鲜粪便中的虫卵，一般多见卵细胞已分裂为10～20个细胞（图16－23）。 图16－23 东方毛圆线虫
中的一种自然疫源性疾病，病原体为病毒。以发热、出血倾向、休克和肾损害为特征。我国学者证实格氏血厉螨、厩真厉螨、鼠颚毛厉螨及柏氏禽刺螨均有自然感染，并能经卵传递。认为革螨对流行性出血热可起媒介和贮存宿主作用。 ⑵森林脑炎：已知有10余种革螨可以自然带病毒。柏氏禽刺螨和鸡皮刺螨可以实验感染动物并能经卵传递。 ⑶立克次体痘：又称疱疹性立克次体病。是由小蛛立克次体（Rickettsia akari）引起的，由血红异皮螨（Allodermanyssus sanguineus）经卵传递
