本试剂盒仅供研究使用,不可用于临床、食品、化妆品等领域。
使用方法
1. 20-100mg 新鲜植物样本经过液氮研磨后,加入 700μL 裂解液 P,涡旋 30 秒。
2. 55℃孵育 1 分钟。
备注:淀粉含量高的样本无需加热可直接进行步骤 3。
3. 12,000rpm 离心 1 分钟,取 500μL 上清液。
4. 加入 250μL 无水乙醇,上下颠倒混匀。
5. 全部加入 RNA 吸附柱中,12,000rpm 离心 1 分钟,倒掉收集管中废液。
6. 向 RNA 吸附柱中加入 500μL 洗涤液 WA,12,000rpm 离心 30 秒,倒掉收集管中废液。
7. 向 RNA 吸附柱中加入 500μL 洗涤液 WB,12,000rpm 离心 30 秒,倒掉收集管中废液。
8. 重复步骤 7 一次。
9. 12,000rpm 离心 2 分钟,倒掉收集管中废液。
10. 将 RNA 吸附柱放入新 1.5mL 无 DNase 无 RNase 离心管,加入 30-50μL 洗脱液 P,室温放置 1
分钟。
11. 12,000rpm 离心 2 分钟,得到 RNA 溶液,-80℃保存。
注意事项
1. 务必在超净台中进行操作,常换手套,防止 RNA 降解。
2. 尽可能使用新鲜样本进行 RNA 提取。
3. 使用无 DNase 无 RNase 的吸头和离心管,防止 RNA 降解,常更换吸头,防止交叉污染。
4. 为了提高洗脱效率,可提前将洗脱液 P 置于 65℃水浴后再使用。
5. 根据后续试验需求,请使用 DNase I(货号 QR0102)进行基因组清除。