脑出血模型

       蛛网膜下腔出血系由脑底或脑表部位的血管破裂，血液破入蛛网膜下腔引起。颅内动脉瘤，脑动、静脉畸 形，高血压动脉硬化等为常见病因。蛛网膜下腔出血后可引起脑血管痉挛。因此，蛛网膜下腔出血和迟发 性脑血管痉挛的模型有许多共同之处，造模时可同时作为参考。

大鼠大脑动脉环线刺法(willis ring was pierce with a line in rats) 

复制方法
1、健康大鼠，雌雄不拘，体重为250～350g。将钓鱼线剪成长约50mm，并在18mm处作标记，酒精消毒 后置于无菌生理盐水中备用。
2、用水合氯醛(按350400mg/kg体重的剂量)或戊B比妥钠(按50～60mg/kg体重的剂量)经腹腔注射麻醉。
3、仰卧固定，剃除颈部毛发，手术区域皮肤消毒。颈正中切口，分离右侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动 脉，结扎、切断颈外动脉分支及颈总动脉分叉处小动脉，并游离颈外动脉主干，沿着颈内动脉暴露翼腭动 脉，在颈外动脉残端放一丝线，使其呈一松结。
4、在翼腭动脉起始部置一微动脉夹，同时夹闭颈总动脉及颈内动脉主干近端。
5、在颈外动脉残端剪一小口，将制备好的栓线插入。此时将颈外动脉残端处丝线的松结拉紧，除去颈内 动脉的动脉夹，继续将丝线沿着颈内动脉插入，直至感到有阻力，这时稍用力再插入1.0～1.5mm后有落 空感即可抽出丝线并除去微动脉夹。

栓线的直径及插入的深度根据动物的体重而定。手术后以脑电流(rCBF)及脑电图(EEG)幅度急剧下降为入 选标准。整个手术过程保持体温在(37±1)℃。对照组手术步骤同上，但在用丝线沿颈内动脉插入后有阻力 感时即停止并随即退出，结扎颈外动脉残端。

EEG的测量可采用多道生理记录仪。在大鼠的颅顶右侧皮下安置银丝电极测量，记录并测量即刻、15、 30、45、60、75及90min EEG，缝合切口并行碘伏消毒后。再分别于24、48、72h后测实验组及对照组 EEG的波幅。

(2)模型特点和比较医学
此实验方法由于采用刺穿大脑动脉(Willis)环的血管分叉处造成血管破裂，未打开颅腔，可真实地反映颅内 出血(颅内动脉瘤破裂出血所致的病理生理状态)。对照组和模型组动物的rCBF及EEG有显著差异，证明该 实验动物模型真实可靠，且动物处死后头部行解剖学检查情况证实有陈旧性出血块包裹大脑动脉(Willis)环，脑前中动脉及基底动脉也有陈旧性出血块包裹。

该模型可根据rCBF及EEG的急剧变化判断实验是否已刺破大脑动脉(Willis)环动脉管壁。线刺法制备的SAH模型对大鼠引起的创伤小，模拟SAH真实可靠，因此适用于SAH后的病理生理机制研究和药物疗效的观察，

2 枕大池注血法(injection of autogenous blood into cistern magna)
(1)复制方法
1、健康大鼠，雌雄不拘，体重为250～300g。大鼠经腹腔注射戊巴妥钠(50～60mg/kg体重的剂量)或水合 氯醛(350～400mg/kg体重的剂量)麻醉，股部和枕部剃毛，皮肤消毒。
2、股根部切口，钝性分离股动脉，在其远端穿过一细线备用。稍稍提起股动脉所穿的丝线，让股动脉充 分暴露。
3、用1ml注射器配4号半针头，在线近端缓缓扎入股动脉，抽取0.07～0.7ml新鲜血，一般0.3ml动脉血即 可引起明显脑血管痉挛，但不足出现脑缺血。
4、鼠头前俯，在左右耳根连线可摸到枕外隆凸，往下大约0.5cm可感觉一凹陷(小脑延髓形成的夹角)，在 此处分开皮肤，找到环枕膜。
5、在解剖显微下将针扎入1mm左右(当针穿过环枕膜时有一突破感)，将由股动脉抽出的血液缓慢注入(开 始操作不熟练时，可用稀释的肝素冲洗针筒)。
6、缝合切口，创口处滴3～5滴庆大霉素(2.50×10000U/kg体重)以防止感染。将动物放回笼中，保持鼠俯 卧位、头低30°，持续30min，让血液靠重力作用下进入基底池。在蛛网膜下腔出血后的2～7d观察脑内出 血及血液吸收消散的情况。

实验也可采用家兔，选健康新西兰白兔，体重为2.0～3.0kg。麻醉后于枕部正中平双乳头连线中点处以6号 注射针头穿刺，按0.3ml/kg体重置换出脑脊液并注入已采集好的等量自体新鲜动脉血。3d后枕大池内再注 等量动脉血1次。

(2)模型特点 模型制作成功的动物一般在蛛网膜下腔出血的2～3d，脑基底部蛛网膜下腔或多或少可见到凝血块，以后 血块逐渐被吸收。1周左右脑表面只见黄色或红色血块留下的痕迹；光镜下可见注血组动物基底动脉管壁 明显增厚，管腔明显缩窄。内皮细胞受到内弹性膜皱折挤压可出现部分脱落，内弹性膜明显皱折，厚薄不 一，有断续。

血管平滑肌细胞呈空泡变性，部分坏死，胞浆浓染，胞核固缩。外膜增生，可见纤维母细胞增多，并见粒 细胞、单核细胞浸润，管腔内可有血栓形成；

透射电镜观察，其结构表现为内皮细胞变性，部分坏死、脱落。胞浆内线粒体肿胀，粗面内质网扩张，部 分脱颗粒，细胞核固缩，核染色质分布不均，核周围间隙增厚，紧密连接扩大或丧失，内有变性坏死的平 滑肌细胞，中膜增厚，平滑肌细胞广泛变性，部分坏死，以靠近管腔侧为重，外膜中神经纤维肿胀，结构 模糊。

为保证动物存活，在操作过程应注意：①进针不能太深，以免损伤脑干。②注血速度不要太快，一般以 0.1ml/ min即可。

(3)比较医学 此方法不足之处是忽视了动脉瘤性蛛网膜下腔出血中动脉管壁损伤的重要性，由于血管损伤，脑组织直接 受到血流冲击，可引起血管活性物质释放，这些都在蛛网膜下腔出血病理生理中起重要作用。

但迄今为止，还无一种动物模型能完全符合人类蛛网膜下腔出血的病理生理表现。因此枕大池注血法仍不 失一种简单易行的蛛网膜下腔出血模型制作方法。