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细菌(Bacteria)磷壁酸(TA)ELISA检测试剂盒

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  • ¥950 - 1280
  • 仕诺达
  • 最低检测浓度小于1.0μg/mL。
  • SND-Q090
  • 安徽
  • 2025年08月09日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 供应商

      仕诺达生物

    • 库存

      999

    • 样本

      上清液,冻干粉等

    • 标记物

      磷壁酸(TA)

    • 适应物种

      细菌

    • 应用

      高校,中科院,研发单位等

    • 检测方法

      ELISA

    • 检测范围

      最低检测浓度小于1.0μg/mL。

    • 规格

      48T/96T

    规格:48T产品价格:¥950.0
    规格:96T产品价格:¥1280.0
    试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
    细菌Bacteria磷壁酸(TA)ELISA检测试剂盒
    使用说明书
    产品细节图片1
    检测原理

    试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包磷壁酸(TA)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的磷壁酸(TA)正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
    样品收集、处理及保存方法
    1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
    2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
    3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
    4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
    5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
    自备物品
    1. 酶标仪(450nm)
    2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
    3. 37℃恒温箱
    操作注意事项
    1.   试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
    2.   实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
    3.   浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度
    4.   严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
    5.   所有液体组分使用前充分摇匀。
    产品细节图片2产品细节图片3产品细节图片4
    试剂盒组成
    名称 96孔配置 48孔配置 备注
    微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条
    标准品 0.3mL*6管 0.3mL*6管
    样本稀释液 6mL 3mL
    检测抗体-HRP 10mL 5mL
    20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释
    底物A 6mL 3mL
    底物B 6mL 3mL
    终止液 6mL 3mL
    封板膜 2张 2张
    说明书 1份 1份
    自封袋 1个 1个
    注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、3、6、12、24、48μg/mL
    试剂的准备
     20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
    洗板方法
    1.   手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
    2.   自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
    操作步骤
    1.   从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
    2.   设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
    3.   样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加
    4.   除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
    5.   弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
    6.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
    7.   每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
    结果判断
     绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

    试剂盒性能
    1.  准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
    2.  灵敏度:最低检测浓度小于1.0μg/mL
    3.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
    4.  重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
    5.  贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
    6.  有效期:6个月
    免责声明
    1.   试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或细菌体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
      严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

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    滁州仕诺达生物科技有限公司(Chuzhou shinuoda Biological Technology Co., Ltd.)是一家以技术开发、转让、销售及咨询服务为一体的生物科技有限公司,公司主要研发销售生物试剂,为全球科研客户提供优质的产品和技术服务。 

    公司主营产品包括:ELISA试剂盒、动物血制品、标准品、染色液、试剂、抑制剂、酶相关试剂以及仪器设备等 经销品牌:Thermo Fisher Scientific、CST、abcam、santa cruz、sigma、Corning、Axygen、NEB、Novus、BD、R&D、阿拉丁(未提及品牌,本公司也可以代买) 公司以“产品质量第一,服务至上”为企业宗旨,秉承友好共赢的合作理念,立志给科研界老师提供我们力所能及的帮助。如果您对我公司的产品及服务有兴趣,期待您给我们个机会在线留言或者来电咨询。

     

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    图标文献和实验
    该产品被引用文献
    枯草芽孢杆菌细胞壁对绵羊瘤胃上皮细胞 β防御素-1 表达的影响
    辛雅明1
    2 赵霏霏1
    2 杨丹1
    2 杨银凤1
    2*
    ( 1. 内蒙古农业大学兽医学院内蒙古 呼和浩特 010018;
    2. 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点试验室内蒙古 呼和浩特 010018)
    摘要: 为探究枯草芽孢杆菌细胞壁能否对绵羊瘤胃上皮细胞 ( ovine ruminal epithelial cellsORECs) 中绵羊 β防御素- 1 ( sheep β-defesin- 1SBD-1) 的表达产生影响先利用反复冻融和超声波破碎相结合的方法破碎枯草芽孢杆菌并成功收集其细胞壁将不同浓度 ( 02550100200400 μg·mL-1 ) 的枯草芽孢杆菌细胞壁与 ORECs 共培养 8 h 采用荧光定量 PCR 和酶联免疫吸附测定 (ELISA) 方法筛选出枯草芽孢杆 菌细胞壁诱导 SBD-1 表达的最佳刺激浓度最后用该浓度条件下的枯草芽孢杆菌细胞壁对瘤胃上皮细胞进行不同时间 ( 2481224 h) 刺激采用荧光定量 PCR ELISA 方法筛选出枯草芽孢杆菌细胞壁诱导 SBD-1 表达的最佳刺激时间结果显示: 枯草芽孢杆菌细胞壁成功制备不同浓度 ( 02550100200400 μg·mL-1 ) 的枯草芽孢杆菌细胞壁对 ORECs 均无毒性作用并能极显著促进 ORECs SBD-1 mRNA 蛋白的表达 ( P<0. 01) ,以浓度为 50 μg·mL-1 的枯草芽孢杆菌细胞壁刺激 ORECs 12 h SBD-1 mRNA 和蛋白的表达量达到最大且与对照组呈极 显著差异 ( P<0. 001) 研究表明枯草芽孢杆菌细胞壁刺激 ORECs 诱导 SBD-1 表达的最佳刺激浓度为 50 μg·mL-1最佳刺激时间为 12 h
    研究为枯草芽孢杆菌细胞壁诱导调节 SBD-1 机制的研究提供理论依据
    关键词: 枯草芽孢杆菌细胞壁; 绵羊瘤胃上皮细胞 ( ORECs) ; β防御素-1; 荧光定量 PCR
    中图分类号: S852. 4
    文献标志码: A
    文章编号: 0529-5130( 2022) 02-0057-07
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