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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Bacillus amyloliquefaciens
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50次
英文名称:Bacillus amyloliquefaciens
解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)为芽孢杆菌属,是一种与 枯草芽孢杆菌亲缘性很高的细菌,其在生长过程中可以产生一系列能够抑制真菌 和细菌活性的代谢物。本产品就是以荧光定量PCR技术为基础开发的专门检测解淀粉芽孢杆菌的试剂盒。

产品特点:
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增解淀粉芽孢杆菌。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
解淀粉芽孢杆菌PCR试剂盒包装规格及成分:
| 编号 |
成分 |
规格 |
| 试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 |
超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 |
解淀粉芽孢杆菌 PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 |
解淀粉芽孢杆菌 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) | 50 μL(黄盖) |
| 试剂五 |
使用手册 | 1 份 |
运输及保存:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。
自备试剂:DNA 模板

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求 的样品起始量)中加 10μL 解淀粉芽孢杆菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液 而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰 上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
| 成分 | N+2 个 样品管 | PCR 阴性 对照 | PCR 阳性 对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 解淀粉芽孢杆菌 PCR 引物 混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
| PCR 阴性对照(水) | 18 μL | ||
| PCR 阳性对照(解淀粉芽孢杆菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液) | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应 (35 个循环) | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 30 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、电泳检测 5. 取 10-20 μL PCR 产物。1%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排 除 PCR 抑制剂的感染。

解淀粉芽孢杆菌PCR试剂盒相关产品:
| 产品名称 |
方法 |
产品规格 |
价格 |
| 解淀粉芽孢杆菌LAMP试剂盒 | LAMP |
50次 |
2490 |
| 解淀粉芽孢杆菌PCR试剂盒 | PCR |
50次 |
1990 |
| 解淀粉芽孢杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 染料法 |
50次 |
2490 |
| 鲍疱疹样病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 探针法 |
50次 |
2990 |
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文献和实验来证明,如细菌水解淀粉的区域,用碘测定不再产生蓝色;水解明胶可观察到明胶被液化;脂肪水解后产生脂肪酸改变培养基的pH,其中的中性红指示剂使培养基从淡红色变为深红色。 三、器材 金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌,大肠杆菌,绿脓杆菌(Bacte-rium Pyocyaneum)斜面各一支; 油脂培养基,淀粉培养基,明胶培养基,无菌平皿,接种环和接种针,革兰氏染色用卢戈氏碘液(Lugol's iodine solution)等。 四、操作
发酵上清就能得到较纯的蛋白,并且表达的蛋白在多数情况下具有天然构象和生物活性。 蛋白质组学研究表明,枯草芽孢杆菌中至少有四种蛋白质分泌途径,其中 Sec 分泌途径是主要分泌途径。另外枯草芽孢杆菌拥有良好的发酵生产技术,目前大部分商业化的蛋白水解酶和淀粉酶都是由其发酵得到的。AtaGenix拥有的 5 L、20 L、150 L及其他型号的发酵罐(上图就是真相),可满足各种大规模发酵的需求。 虽然枯草芽孢杆菌表达外源蛋白潜力无限,但也有其短板,如自身胞外蛋白酶对表达产物的降解
枯草芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌,是芽孢杆菌属的一种。单个细胞0.7~0.8×2~3微米,着色均匀。无荚膜,周生鞭毛,能运动。革兰氏阳性菌,芽孢0.6~0.9×1.0~1.5微米医学教育网搜集|整理,椭圆到柱状,位于菌体中央或稍偏,芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明,污白色或微黄色,在液体培养基中生长时,常形成皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉,分解色氨酸形成吲哚。在遗传学研究中应用广泛,对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机制研究较清楚。广泛分布










