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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
北京赛百盛基因技术有限公司
- 规格:
5×1mL
目录号:HPM-5
产品概述
HotSensorTM PCR MasterMix是我们为提高DNA产物的特异性提出的解决方案。
本产品包含HotSensorTM DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。其中HotSensorTM DNA聚合酶是一种经过基因改造的热启动酶。在室温下,HotSensorTM DNA聚合酶处于失活状态,只有高温才可以激活其酶活性。同时HotSensorTM DNA聚合酶还存在一个单链DNA黏合蛋白(single-strand DNA binding protein),该蛋白可以将引物隔离。这两个特性使得HotSensorTM DNA聚合酶在常温下能避免非特异性结合与扩增,适用于需要非常高的专一性的实验。
使用预先配制的2× HotSensorTM PCR MasterMix,只需加入引物和模板即可进行扩增,减少了移液操作,最大限度提高了通量和结果的重现性。扩增产物3'端带A,可以直接用于T/A载体克隆。绿色的染料在1%的琼脂糖凝胶中与3-5kb DNA片段的迁移率相同,黄色的染料在1%的琼脂糖凝胶中比引物迁移得快(<50bp)。
使用说明
1.冰浴中彻底融化2×MasterMix,混匀后短暂离心。
2.我们强烈建议客户购买本产品后分装成小份避免反复冻融。
3.以50μl反应体系为例,按照下表在0.2ml PCR管中加入下列成分:

4. 短暂离心将反应液收集到管底。
5. 若基因扩增仪不防蒸发,请加1-2滴石蜡油。
6. 在PCR仪上执行以下程序(仅供参考):

注:在实际操作中需根据模板的结构、扩增片段的大小和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
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文献和实验的PCRMIX,是目前最“傻瓜”的 PCR 反应体系之一,不论是质粒、菌液、CDNA、基因组 DNA、或者是直接裂解的粗提物,GC 含量高达 75% 的模板,都能轻松扩增,不需要费力的“摸条件”! 本产品包含酶、dNTP、特殊稳定剂和优化的反应缓冲液,浓度为 2x。DNA 扩增时,只需加入模板,引物和水,使 MasterMix 溶液的浓度为 1× 即可进行反应。具有快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。进行 PCR 扩增可以减少操作时间,避免因多步操作带来的污染,特别适宜高通量筛选基因的扩增
技术、TALEN技术和CRISPR/Cas9技术的基因敲除研究。 实验流程1. 基因组DNA的准备:提取野生型和突变型细胞的基因组DNA。Genloci公司专为阳性克隆筛选设计的TNA抽提试剂盒也能帮您的忙,只需500个左右的细胞即可提取全基因组DNA。 2. 杂交DNA的准备:a) PCR引物设计:一般扩增产物长度为300~600 bpb) PCR扩增:获得杂交DNA 3. Cruiser™酶筛选阳性克隆:无需纯化DNA,直接使用PCR产物,混合体系后45℃下反应15~20 min K562
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