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Thermo ScientificTM EASY-nLC 1200TM 是纳升级LC系列产品EASY-nLC家族中的zuixin成员。该系统具有在更高高压(1200bar)条件下分离生物分子(比如蛋白质和肽)的独特性能。这款仪器使用极其简便,可与一系列Thermo ScientificTM 质谱仪系统无缝连接以直接执行安全可靠的检测。
EASY-nLC 1200可以利用含1.9 μm 填料的75 cm长 UHPLC色谱柱上更短的梯度,表现了出色的分离能力,得到非常尖锐的谱峰。该系统先进的设计使其通过更高的压力以及微珠尺寸和柱长的变化,使蛋白质和肽的识别率提高了10%。而识别率的提高对于蛋白质组学研发具有非常重要的意义。EASY-nLC 1200在Thermo ScientificTM XcaliburTM 软件平台上运行,可与全系列的Thermo Scientific LC-MS系统轻松连接。
EASY-nLC 1200的更高的操作压力范围显著缩短了分析周期,其设计旨在通过加速上样和柱重新平衡的过程提高分析效率。简明的一体化配置方便而耐用。
1. 高级流速控制
· 智能流速控制(IFC)加快上样和平衡的速度,并防止色谱柱阻塞
· 高级流速控制(AFC)保证流速的精度,提供出色的样品间重复性
2. 内置计算机& 维护
· 自动检漏表明实际泄漏的位置
· 进样前自动气泡检测,防止损失样品
· 系统背压测试快速检测流路阻塞情况
· 自动化的内置维护步骤
· 通过网络远程访问,解决系统问题
· 疑难问题的事件日志
· 系统定期维护时间提醒
3. 集成设计
· 设计结构有利于组件更换
· 无脉冲泵zuida程度减少密封垫、阀门和接头的更换
· 软件利用优化的流动路径
· 使用免维护切换阀,无需更换转子
4. 稳定的无脉冲梯度
· 工厂配置的流动路径最小化工作容量
· 最佳色谱准确性:不分流梯度混合,逐步控制的纳升级注射泵以及流动相的流速传感器控制
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文献和实验辨率” 扫描。这种扫描可以测定肽段的电荷和质量。这里为 MS/MS 选择了两个离子。选定离子的数量取决于肽段的洗脱时间、肽段混合物的复杂性、每次扫描的速度以及仪器的灵敏度。对于复杂混合物,不使用 MS ZoomScans,增加选定离子的数量(最多 5 个) 。这就会增加待分析肽段的数量。 ( 7 ) 纳流喷雾源安装摄像头,可以让用户看到喷头和喷雾,便于调整和故障排除 。当 LC 泵开始运行接通电压后,液滴必须喷出,喷头上不能有任何液体。 ( 8 ) 在 http://www. abrf.
1. 前言 应用于复杂的肽复合物分离和鉴定的纳升级 2D 液相色谱串联质谱(LC-MS/MS ) 技术的发展,是近年来蛋白质组学领域最重要的进展之一 [ 1,2] ,这种技术通常被称为多维肽段鉴定技术(Mudpit) [3] 。该方法首先将复杂的蛋白混合物用一种蛋白酶(如胰蛋白酶)消化成一组大小不一的肽段混合物,然后用相互垂直的二维液相色谱分离这个肽段混合物,用这种二维液相色谱技术分离肽混合物不是各相液相色谱分离组分的简单算术总和,而是根据肽在各相液相色谱中的迁移特性,最终获得分离的肽
系列):高拷贝会导致大片段质粒复制压力大,易丢失或断裂,优先用低拷贝载体(如 pACYC184,拷贝数 10-15)或大片段专用载体(如 BAC 载体 pBeloBAC11,可容纳 100kb 以上片段,在大肠杆菌中稳定存在); ④选择合适的连接方法,比如 Gibson 组装(无缝克隆)的方法更适合 10-20kb 大片段的连接,相比传统的 T4 连接的方法,成功率更高,操作更简便; ⑤选择重组缺陷型感受态,提高大质粒的转化效率,如 Stbl3、DH10B 等,此外转化方式也会影响转化
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