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小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0细胞,
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SP20
复苏
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武汉天德
888
Sp20
生长良好
-20℃
顺丰常温运输
是
淋巴母细胞样
小鼠
骨髓
小鼠骨髓瘤细胞Sp2/O细胞,SP20细胞,Sp2/0,Sp20(带种属鉴定)细胞代次低,活性高,品质保证,提供全程7*24小时专业技术指导售后服务―(养不活无理由全额退款)咨询QQ:929192314手机18064125815(同微信)
细胞名称: sp2/0细胞,SP20细胞,/小鼠骨髓留细胞种属来源:小鼠组织来源: 骨髓疾病特征:骨髓瘤细胞形态: 淋巴母细胞样生长特性:半贴壁生长培养基: RPMI-1640,90%;FBS,10%。生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%;温度:37C,传代方法: 1:2至1:6,每周2次。冻存条件: 90%完全培养基+10%DMSO,液氢储存支原体检测:阴性Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞特点和简介小鼠骨髓瘤,HGPRT缺失;不生成免疫球蛋白。Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞接受后处理1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37C培养约2-3h。3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。4)如果细胞密度达80%-90%请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞培养操作1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37C水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37C培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3.按6-8ml瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在100ORPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4.将细胞悬液按1:2比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为类;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2.4 min 1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞培养注意事项1.收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。⒉仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。3.用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养4~6小时,再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。4.静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留6~8mL维持细胞正常培养,待细胞汇合度80%左右时正常传代。5.请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。6.建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和Procell技术部沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。7.该细胞仅供科研使用。
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