微量离心管；5.0ml；无菌；自然色

类器官培养与应用——肺类器官

板置于显微镜下。在不破坏单层细胞的情况下，用移液器吸头轻轻移出自由漂浮的球体，并将其转移到 1.5ml 的离心管中。让球状体在离心管底部沉降 5-10 min，必要情况下可以用微量离心机低速离心 10s。 9、将吸出的球体接种于 200μl  含蛋白浓度 8.0mg/ml 的 Matrigel 胶中，轻轻吹打混匀，迅速操作并防止气泡产生。 10、在 24 孔板的每个培养孔中心接种 25μl  混合液，放入 37℃ 培养箱中静置 10min。待 Matrigel 凝固后，加入 0.5ml hLOs

小鼠脾脏单细胞悬液制备流程及注意事项

小鼠脾脏单细胞悬液制备流程 a)研磨法 小鼠颈椎脱臼处死，置于75%酒精浸泡5 min后，取出小鼠，置于无菌操作台上，左腹侧朝上。 小鼠左腹侧中部剪开小口，撕开皮肤，暴露腹壁，可见红色长条状脾脏。 脾脏下侧提起腹膜，剪开后上翻，暴露出脾脏。用镊子提起脾脏，眼科剪分离脾脏下面的结缔组织，取出脾脏，并浸泡于干净的PBS溶液中。 将脾脏置于200目筛网中，用组织研磨棒轻轻研磨至没有明显红色块状物。 用15 mL PBS冲洗筛网，并将冲洗液收集于15 mL离心管，300 g离心5 min，弃上清

小鼠骨髓单细胞悬液制备流程及注意事项

），剪去两端软骨，露出红色的骨髓腔。注意在该过程中应保留尽可能多的骨髓腔。 拿一支1 mL的无菌注射器，吸取1 mL PBS，轻轻插入骨髓腔，冲洗骨髓腔以获得骨髓。重复2~3次，可冲出绝大部分细胞。冲洗完后，用移液器轻轻吹打细胞，将细胞团吹散。 将冲洗液用200目的滤网过滤，滤液收集于15 mL离心管中，300 g离心5 min，弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬细胞，细胞计数，并调整细胞浓度至1×107/mL。 注意事项： 骨髓样本细胞分群明显，可以裂解红细胞，也可不裂解。如需裂解红细胞，可以加入