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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
现货
- 英文名:
Lysis buffer for exosome
- CAS号:
-
- 保质期:
-20℃保存,有效期12个月。
- 供应商:
爱必信(上海)生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃保存,有效期12个月。
- 规格:
20ml
| 描述 | Exosome(外泌体)是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小襄泡,具有典型的脂质双分子层结构,存在于 细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中。Exosome携带有多种蛋白质、 脂类、 DNA和RNA等重要信息,不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用,更有望成为多种疾病的早期 诊断标志物。 外泌体专用裂解液针对外泌体样本研发,能够高效的裂解外泌体蛋白。裂解液中含有蛋白酶抑制剂,有效 抑制蛋白降解,适合样本裂解后进行BCA检测,Western Blot等实验。本试剂含有高浓度的去垢剂,不适合 Bradford法测定蛋白浓度。 |
| 使用方法 | 1、实验前请将裂解液置于2 ~ 8℃融化,冰上备用。 2、外泌体重悬液按照1:1的体积比加入裂解液,轻轻吹打混匀,置于冰上裂解10min。 3、4℃,12000×g离心5min取上清,用BCA法测定蛋白浓度或进行Western Blot等后续实验。 |
| 储存/保存方法 | -20℃保存,有效期12个月。 |
| 注意事项 | 1、本产品含有蛋白酶抑制剂,请分装保存,避免反复冻融。 |
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文献和实验,后续培养后收集的细胞上清中的外泌体不确定是从细胞分泌的还是血清中来的,影响结果的准确性。 2. 营养:细胞培养是需要一定的营养的,那么如果不加血清,单独只用基础培养基,就会导致细胞处于饥饿状态,严重影响细胞生长,甚至出现吞噬外泌体的现象,影响实验结果。 3. 杂蛋白:去外泌体胎牛血清可以很好地解决 1、2 中涉及的问题,但还会存在杂蛋白影响蛋白定量结果,导致数据偏高,影响后续实验的准确性。如果使用外泌体专用无血清培养基(专门针对外泌体获取的培养基,化学成分明确,类似于完全培养基的一种
保存。 13、如何鉴定提取的外泌体? 通常会用到:透射电镜检测(形态)、NTA 粒径检测(大小)、Western Blot 检测等方法对提取的外泌体进行鉴定。在进行 Western Blot 检测时,常用的外泌体标志蛋白有CD63、CD9、CD81、TSG101 等。 14、提取的外泌体进行 Western Blot 前是否需要加入 RIPA 试剂裂解? 需要。一般按照 1:1 的比例加入强 RIPA 试剂,或推荐使用外泌体蛋白专用裂解液。 15、进行外泌体 Western Blot 鉴定时有无内参
首先,从细胞的培养过程下手。外泌体来自细胞,因此必须先从源头抓起。大部分的细胞培养过程中都是带有血清的,无论是牛血清、马血清等都是含有异源外泌体的,而我们研究的目标通常是细胞所分泌的外泌体,因此需要尽可能的去除这些异源外泌体的干扰。那么我们需要怎么做呢? 这里需要了解一个大原则:在细胞正常生长的条件下,尽可能的减少血清外泌体或者不使用血清。方法一,可以通过超速离心的方法去除血清中外泌体。方法二,通过外泌体专用无血清培养基来替代完全培养基,维持细胞










