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绵羊布鲁氏菌PCR试剂盒
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100
Brucella ovis PCR Kit
/
1年
优利科(上海)生命科学有限公司
-20℃
50T
英文名称:Brucella ovis PCR Kit 绵羊布鲁氏菌病是由绵羊布鲁氏杆菌引起的一种潜伏性、慢性的绵羊传染 性疾病,人畜共患,引起绵羊不同程度的附睾炎,可导致其生殖性能下降甚至不 育。布鲁氏菌病严重影响绵羊的生产性能,给养殖业造成了巨大的经济损失。 本产品是根据 PCR 原理开发的绵羊布鲁氏菌检测试剂盒。
产品特点:1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩绵羊布鲁氏菌,与其他病原没有交叉 反应。3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
绵羊布鲁氏菌PCR试剂盒包装规格及成分:
编号
成分
试剂一
试剂二
试剂三
试剂四
试剂五
运输及保存:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:样品 DNA。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备 1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。 2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求 的样品起始量)中加 10μL 绵羊布鲁氏菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液 而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰 上待用。 二、设置 PCR 反应(40μL 体系) 3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
N+2 个 样品管
PCR 阴性 对照
PCR 阳性 对照
PCR Magic Mix 3.0
各 20 μL
20 μL
绵羊布鲁氏菌 PCR 引物 混合液
2 μL
N+2 个样品 DNA 模板
各 18 μL
PCR 阴性对照(水)
18 μL
PCR 阳性对照(绵羊布鲁 氏菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液)
4. 按下表设置 PCR 反应:
过程
温度
时间
预变性
95℃
5 min
PCR 反应 (35 个循环)
30 sec
55℃
72℃
最后延伸
7 min
三、电泳检测 5. 取 10-20 μL PCR 产物。1%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物。本产品提 供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排 除 PCR 抑制剂的感染。绵羊布鲁氏菌PCR试剂盒相关产品:
产品名称
方法
产品规格
价格
LAMP
50次
2490
PCR
1990
染料法
探针法
2990
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324 人阅读发布时间:2022-01-12 15:19
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