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细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | 2V6.11人胚肾细胞 |
| 细胞别称 | 无 |
| 细胞货号 | SNL-249 |
| 来源 | 胚肾;5型腺病毒及SV40转化;女性;胚胎 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | 转化细胞系 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 2 |
| 培养条件 | DMEM+10% FBS+1% P/S(货号:SNLM-249) |
| 培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
| 细胞简介 | 2V6.11细胞是2001年从人胚肾细胞株293 [HEK-293]衍化而来,293 [HEK-293]细胞用携带Zeocin-抗性标记的质粒pVgRXR转染得到293pVgRXR细胞。随后,用包含编码E4 24K的Ad5 E4ORF6基因的质粒pEKORF6转染。pEKORF6从包含潮霉素抗性基因的质粒pIndHydro衍生而来,载体包含SV40病毒序列。2V6.11细胞株最初从含潮霉素的培养液中用克隆环分离单克隆得到。2V6.11细胞诱导表达的人腺病毒E4,可通过免疫印迹法检测到34KDa蛋白;2V6.11细胞可以用作研究腺病毒E4癌基因的工具。 |
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文献和实验型18个、增强型23个)、相应的实验模板、数据采集卡及处理软件、实验台桌等六部分组成。(1)主控台部分,提供高稳定的±15V、+5V、±2V±4V±6V±8V±10V、及+2V~+24V可调四种直流稳压电源;主控台面板上还装有电压、气压、频率、转速的3位半数显表及计时表。音频信号源(音频振荡器)1KHZ~10KHZ(可调);低频信号源(低频振荡器)1HZ~30HZ(可调);气压源0~20kpa可调;高精度温度转速两用仪表;RS232计算机串行接口;流量计;漏电保护器;其中电源、音频、低频均具有断路
,4℃放置6hr以上(或过夜) 7. 10,000 rpm,4℃离心20 min 8. 弃上清,用500 ulSSTE溶解沉淀 9. 酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提两次,氯仿:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000 rpm,4℃,5 min) 10. 加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30 min以上 11. 12,000 rpm,4℃离心20 min 12. 弃上清。沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥 13. 加200 ul的DEPC处理水溶解 14
ulSSTE溶解沉淀 9. 酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提两次, 氯仿:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000 rpm,4℃,5 min) 10. 加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30 min以上 11. 12,000 rpm,4℃离心20 min 12. 弃上清。沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥 13. 加200 ul的DEPC处理水溶解 14. 用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量 (在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数
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