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细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | hFOB1.19[暂不提供]人SV40转染成骨细胞 |
| 细胞别称 | hFOB1.19;hFOB |
| 细胞货号 | SNL-217 |
| 来源 | 成骨细胞;SV40转化;条件永生;女性;胎儿 |
| 细胞形态 | 梭形细胞 |
| 细胞类型 | 转化细胞系 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 收录 | 中科院NCACC |
| 生物安全等级 | 2 |
| 培养条件 | DMEM/F12+0.3mg/mL G418+10% FBS+1% P/S(货号:SNLM-217) |
| 培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
| 细胞简介 | hFOB1.19细胞是在0.6mg/mL新霉素G418存在下,用温度敏感的表达载体pUCSVisA58转染自然流产的胎儿四肢组织建立的,在33.5℃下细胞分裂很快,而在限制温度39.5℃下细胞极少分裂或不分裂。 hFOB1.19细胞具有分化为表达造骨细胞表型的成熟造骨细胞的能力。hFOB1.19细胞提供了一个同质化的快速增殖模型系统,用于研究正常人造骨细胞的分化、造骨细胞生理和激素、生长因子和对造骨细胞的功能及分化有影响的细胞因子。 |
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文献和实验基因,提供转录活力的内对照, 使测试不被实验条件变化所干扰。通过这种方法,可减少内在的变化因素所削弱的实验准确性,比如,培养细胞的数目和活力的差别,细胞转染和裂解的效率。使用萤火虫荧光素酶,结合氯霉素乙酰转移酶(CAT),β-半乳糖苷酶(β-Gal),或葡萄醛酸糖苷酶(GUS)的双报告基因,近几年已普遍使用。但这些双报告基因组合削弱了荧光 素酶操作的优势 , 比如荧光素酶测试和定量可在几秒钟内进行, 但CAT,β-Gal和GUS测试法, 则在定量前需要长时间的保温。另外,这些报告基因受限于它们的灵敏
【求助】请教给位站友,通过RNAi技术使基因不表达。希望各位站友多多帮忙。
可以选择文献 在线设计软件 公司设计等方式 2.目的基因表达水平验证 干扰之前 看一下目的基因的表达水平 如果比较高则可以进行干扰实验 3.成骨细胞是否是原代细胞? 通过细胞转染情况 选择三种干扰方式 A 化学合成 B。质粒 C。病毒等介导 4.验证靶点的有效性 目的细胞中验证有效性,先可以WB,毕竟干扰的目的是使蛋白减少的。但是有可能出不来结果。这个时候也未必是干扰序列无效。请用realtime验证。或者两则同时做
large T antigen(大T抗原)。293A细胞是293来源的细胞,含有腺病毒E1早期基因,而我们使用的腺病毒载体为了提供克隆的空间,即装载外源基因空间,缺失了E1的早期区,因此当我们转然E1缺失的病毒载体到293A时,由于293A能提供E1早期蛋白,才能形成有感染力的腺病毒颗粒。腺病毒的包装使用的是293A细胞。另外,293T也并不是专门用来包装慢病毒的,还可以有许多其它用途。293T可以包装aa,三质粒共转染的方法里,对293细胞的要求就是细胞要表达腺病毒的E1A,E1B蛋白,即腺病毒的E1
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