耳念珠菌PCR试剂盒

耳念珠菌PCR试剂盒

英文名称：Candida auris PCR Kit
耳念珠菌( Candida auris ) 是一种近年来出现的酵母，该菌株可引起侵袭性感染， 对氟康唑等抗真菌药物呈现多重耐药性，感染患者具有较高的死亡率。耳念珠菌可引起血 流感染、伤口感染和耳炎。本产品是根据 PCR 原理开发检测耳念珠菌的试剂盒。

产品特点：
1.即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR50 次，但只能用于科研。

耳念珠菌PCR试剂盒包装规格及成分：

编号	成分	规格
试剂一	PCR Magic Mix 3.0	1mL（绿盖）
试剂二	超纯水	1mL（黄色）
试剂三	耳念珠菌 PCR 引物混合液	100μL（白盖）
试剂四	耳念珠菌 PCR 阳性对照 （1×10E7 拷贝/μL）	50μL（黄盖）
试剂五	使用手册	1 份

运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。

自备试剂：DNA 模板


 

使用方法：

一、样品 DNA 的制备 1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼 容。 2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制 备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加 10μL PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水，提取 结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。 二、设置 PCR 反应（40μL 体系） 3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故 需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：成分 样品管 N+2 个 PCR 阴性 对照 PCR 阳性 对照 PCR MagicMix3.0 各 20μL 20μL 20μL 耳念珠菌 PCR 引物混合液 各 2μL 2μL 2μL N+2 个样品 DNA 模板 各 18μL 不加 不加 PCR 阴性对照（水） 不加 18μL 不加 PCR 阳性对照（耳念珠菌 PCR 阳 性对照的 10000 倍稀释液） 不加 不加 18μ
4. 按下表设置 PCR 反应：过程 温度 时间 预变性 98℃ 10min PCR 反应 （40 个循环） 98℃ 30sec 60℃ 30sec 最后延伸 72℃ 10min
三、电泳检测 5. 取 10-20 μL PCR 产物，进行电泳。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后需要另外 再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期片段大小条带出现，预期片段 110bp。阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀 释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。



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