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- 赛泓瑞生物
- 进口
- SHC1131H
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
SHCC
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
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种属 |
人 |
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别称 |
MCF 10A; MCF.10A; MCF10A; MCF10a; MCF-10 Attached; Michigan Cancer Foundation-10A |
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组织来源 |
乳腺；乳房 |
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疾病 |
纤维囊性疾病 |
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传代比例/细胞消化 |
1:2传代，消化3-5分钟 |
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完全培养基配置 |
DMEM/F12培养基；5%马血清；10UG/ML胰岛素；20NG/ML EGF；0.5UG/ML氢化可的松；1%双抗 |
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简介 |
人乳腺细胞MCF 10A是一种非致瘤性上皮细胞系。上皮唾液酸粘蛋白(epithelial sialomucins)，细胞角蛋白(cytokeratins)和乳脂肪球抗原(milk fat globule antigen)阳性。MCF 10A在胶原蛋白中呈现三维生长，并在融合时形成圆顶状形态。迄今为止，细胞未显示终末分化或衰老的迹象。该细胞系对胰岛素、糖皮质激素、霍乱肠毒素和表皮生长因子(EGF)有响应。通过电子显微镜观察，该细胞呈现管腔导管细胞的特征，但不呈现肌上皮细胞的特征。培养液中的钙含量对细胞的形态影响很大。 |
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形态 |
上皮细胞样 |
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生长特征 |
贴壁生长 |
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倍增时间 |
每周 2 至 3 次 |
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STR |
Amelogenin: X CSF1PO: 10,12 D13S317: 8,9 D16S539: 11,12 D5S818: 10,13 D7S820: 10,11 THO1: 8,9.3 TPOX: 9,11 vWA: 15,17 |
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培养条件 |
气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 |
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冻存条件 |
冻存液：90%FBS，DMSO 10%, 或使用非程序冻存液：官网货号SH-H040 |
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保藏机构 |
ATCC; CRL-10317 |
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产品使用 |
仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
1）复苏细胞：将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
- 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
a、收集细胞，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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文献和实验MCF―10A、HBLl00、MCF―7和MDA―MB―231中，14―3―3σ基因CpG岛是非甲基化的，而在Hs578t和MDA―MB―435中却是完全甲基化的。体外实验表明，用5―氮杂―2―脱氧胞苷处理14―3―3。基因失活的细胞可恢复其表达，这更进一步说明14―3―3σ基因表达沉默与其CpG岛甲基化密切相关。此外，6个正常乳腺上皮活检标本都未发生甲基化，而32例乳腺癌的活检标本14―3―3σ基因都发生甲基化。这些研究结果表明，乳腺癌中14―3―3σ基因的表达缺失与甲基化密切相关。
Nature 深度剖析：管坤良与 Alj 组研究成果为何截然相反，Hippo 通路调控乳腺癌的两面性
1/2，可能会造成不同实验结果。作者猜测，敲除 LATS1/2 带来的 YAP/TAZ 异常持续活化可能对细胞状态有较大的改变，从而使细胞启动某些不为人知的代偿通路以维持稳态，从而改变了 Hippo 通路对 ERα 的调控模式。此外，在 LATS1/2 过表达实验中，Alj 组使用的是瞬间转染，而管组使用的是稳定转染，作者认为这或许会带来一定差异。 2. 其次，双方使用的细胞培养条件有部分不同。Bentires-Alj 组使用的是 M5 培养基培养 PHBECs 和 MCF10A 细胞，鉴于这一培
breast epithelial MCF-10A cells. 科学问题：双酚 S (BPS) 与双酚 A (BPA) 具有相似的雌激素效应。考虑到 BPS 的内分泌干扰效应，本研究采用基于质谱的代谢组学和定量蛋白质组学方法，研究了 BPS 对正常人乳腺上皮细胞株 MCF-10A 的影响。 研究内容 表型实验：暴露于 BPS 达 24 小时后，MCF-10A 细胞的增殖以一种刺激的方式发生改变，在剂量为 1μM 时增殖率最高。 蛋白质组分析：总共有 200 种蛋白质被鉴定为在暴露于 BPS
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