Fluo-4是一种将Fluo-3结构中的Cl离子替换成F离子的钙荧光探针。由于将Cl离子替换成了电子吸引力更强的F离子,它的最大激发波长会向短波长方向偏离10 nm左右。这个波长更接近于氩激光器的波长,所以用氩激光器激发时,Fluo-4的荧光强度比Fluo-3更强。 Fluo-4, AM ester穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-4,从而被滞留在细胞内。Fluo-4以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的,但是与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。
注意事项
1. 如果使用含有血清的培养基,血清中的酯酶会分解 AM ester 体,从而降低 Fluo-4, AM ester 进入细胞的效果。另外,含有酚红的培养基会使本底值略微偏高,加工作液前应尽量去除残留培养基。 2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光。 3. Fluo-4, AM ester 容易吸潮,从冰箱取出后,请确认在干燥的环境放至室温后开封。由于试剂极微量,开封前请将其短暂离心,以保证粉末落入管底。 4. Fluo-4, AM ester 遇水极易分解,如果不能一次用完,建议将储液小量分装保存。 5. 产品仅供科研。