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北京云肽生物科技有限公司
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TBD LTS1092P小鼠脾脏淋巴细胞分离液试剂盒,产品简介:
产品品牌:TBD
产品名称:小鼠脾脏淋巴细胞分离液试剂盒
产品货号:LTS1092P
产品规格:200ML/KIT
TBD LTS1092P小鼠脾脏淋巴细胞分离液试剂盒,产品说明:
外周血淋巴分离液【预期用途】
适用于从人抗凝血液中分离单个核细胞(主要为淋巴细胞),无菌条件下所
分离的细胞可用于免疫学检测。
外周血淋巴分离液【检验原理】
外周血中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞等细胞,其体积、形态和密度
与其他细胞不同,红细胞和白细胞等细胞密度较大,为 1.090 g/ml 左右,而淋
巴细胞和单核细胞密度为 1.075~1.090 g/ml,血小板为 1.030~1.035 g/ml。
为此,本公司将葡聚糖(右旋糖酐)和泛影酸葡甲an按一定比例混合,调整比重、
pH 值和渗透压,经过澄清及除菌过滤后制成一种密度在 1.077g/ml 并且近于等
渗的溶液(分层液),经过密度梯度离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分布,
从而将各种血细胞加以分离。
【检验方法】
取新鲜抗凝血 1ml,与注射用生理盐水 1:1 混匀后,小心加于 2ml 的细胞分
离液之液面上,以 400g 离心(半径 15cm 水平转子)20 分钟,此时离心管中由上
至下细胞分四层。*层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞。第三层为透
明分离液层。第四层为红细胞层。收集第二层细胞放入含注射用生理盐水 4-5
毫升的试管中,充分混匀后, 400g,离心 20 分钟。沉淀经反复洗 2 次即得所需
细胞。(此方法效果较好,推荐使用)
【主要组成成份】
本品为带有乳光或微乳光的注射水溶液,主要组成成份是葡聚糖(右旋糖酐)
与泛影酸葡甲an。
【储存条件及有效期】
18-25℃避光保存,有效期 2 年。启封后置 4℃保存,有效期 1 周。本品为
真空包装,未启封前置于 10℃ 以下易出现白色结晶,影响分离效果。
【适用仪器】
半径 15cm 水平转子离心机。
【样本要求】
本分离液要求血液为新鲜的抗凝血,血液收集时应无菌操作且在储存、处理
和运输过程中避免冷冻和冷藏。
【参考值(参考范围)】
收集淋巴细胞的纯度大于 80%。
【检验结果的解释】
由于各品牌离心机的性能不同,国内南北地区温度环境和四季的差异,可能
影响分离效果,用户可以调节离心转数和离心的时间,摸索zui佳的分离条件(具
体分离条件各实验室自定)。
【检验方法的局限性】
本试验要求,在正常大气压下,样本、分离液及分离环境温度为 20℃± 2℃。
本分离液在低温时呈较高密度,在高温时呈较低密度。
【产品性能指标】
密度 1.077 ± 0.001g/ml
pH 7.0-7.5
渗透压 280-340mOsmol/kg
400g,离心
20 分钟
中国医学科学院生物医学工程研究所灏洋生物联合实验室监制
内毒素 <0.06EU/ml
无菌 直接接种培养 14 天后培养基澄清
澄明度及不溶性颗粒物 每 50ml 溶液中含 10μm 以上的不溶性微粒 20 粒以
下,含 25μm 以上的不溶性微粒 5 粒以下
【注意事项】
1. 启封后应置 4℃保存,避免微生物的污染。
2. 细胞分离液从冰箱取出后,不可立即使用,需待溶液温度升至室温时,摇匀
后使用。
3. 整个分离过程中,温度应控制在 20℃± 2℃且在无菌环境下进行,避免微生
物的污染,否则会影响分离质量。
产品订购信息:
品牌 货号 产品名称
TBD LTS1077 人外周血淋巴细胞分离液 200ml
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文献和实验细胞筛网置于培养皿中,取小鼠脾脏放置于筛网中,加入 5ml 达优小鼠淋巴细胞分离液,对脾脏轻轻进行研磨(注:此步操作要快,避免分离液蒸发); 2. 把悬有脾脏细胞的的分离液立即转移至 15ml 离心管中,随后在分离液上层轻轻覆盖 500-1000μl 的 RPMI1640 培养基(保持分离液与培养基分界明显); 3. 室温,水平转子 800g 离心 30 分钟,设置离心机为缓升缓降; 4. 离心结束后吸出淋巴细胞层(白膜层),加入 10ml RPMI1640 洗涤一遍细胞,250g 离心 10
1、将静脉血20ml用ACD抗凝剂以容积比血:抗凝剂=9:1抗凝处理 2、按血:分离液=1:2注入国产淋巴细胞分离液上层,400g 20℃离心30分钟 3、交接层重浮于4倍体积的RPMI1640并通过离心法200g,10min洗三次 4、获得细胞可做分选或其他实验。 体会: 1、实验中我用过肝素方法抗凝,但效果不好,因为肝素抗凝后交接层混浊,洗涤后没有细胞。后来是一位老师推荐我用ACD抗凝剂,效果very good 2、实验用的是国产淋巴细胞液(天津TBD),没有用过进口
表现 Hp抗体 阳性 总数(%) 农村 有症状 358 403(88.8) (1010人) 无症状 276 637(43.3) 城市 有症状 231 441(52.4) (896人) 无症状 132 455(29.0) 合计 有症状 589 844(69.8) (1936人) 无症状 408 1092(37.4) P 2.2 Hp感染与症状的关系 由表2可见,无论城市或农村,有症状者的Hp抗体阳性率明显高于无症状者,说明症状与Hp感染密切相关。另外,Hp感染与性别、职业、是否吸�
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