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- 国产
- 2025年12月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
741
- 英文名：
Column Myco RNAout
- 保质期：
1年
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
常温
- 规格：
50次
产品简介：
中文名称：柱式分枝杆菌RNAout
英文名称：Column Myco RNAout
产品规格：50次
产品货期：现货
产品运输：常温运输
产品介绍：提取分枝杆菌的总DNA
产品及特点：
分枝杆菌属（Mycobacterium）是极为古老的细菌，与人类的疾病相关的就有 25 种以上，包括引起结核病的结核分枝杆菌（Mycobacteria tuberculosis）。近 年来由于多重耐药性分枝杆菌的出现，分枝杆菌再次成为人们关心的细菌。PCR 快速诊断是目前检测分枝杆菌的主流方法，但由于此类细菌具有十分独特的坚硬的 细胞壁，快速提取其基因组 RNA 一直是十分棘手的技术问题。
柱式分枝杆菌RNAout具有下列特点：
1. 操作简单，客户不需要准备额外的试剂。
2. PCR 检测灵敏度一般在 10-100 CFU/mL 样品。
3. 既可以使用培养的细菌，也可以使用痰液、精液、血液、脑脊液等样品。
4. 价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格便宜。
5. 安全无毒，本试剂盒对人体无害，无腐蚀性和刺激性气味。
6. 本产品只能用于科研。
规格及成分：
运输及保存：常温运输及保存，但化痰液成分（干粉）需要低温运输、-20℃保存，有效期一年。
自备试剂：TE 缓冲液，氯仿。
本产品仅供科研
使用方法：
注意：试验所用的实验室环境、耗材等均需要 RNase-free。
一: 培养的分枝杆菌样品的预处理
1. 刮取培养的分枝杆菌到 0.5 mL 自备 TE 缓冲液中。
2. 80℃放置 20 分钟以杀灭细菌。
3. 3000 g 室温离心 15 分钟，弃上清。
4. 将细菌沉淀放-20℃冰箱备用或直接进入细菌基因组 RNA 提取步骤。
二: 含分枝杆菌的痰液样品的预处理
1. 将痰液样品(0.5mL-2mL)加入到干净的 10 mL 或 15 mL 塑料离心管中。
2. 加 2mL 的自备蒸馏水，在加入 100mg 化痰液干粉，充分混合均匀后室温放 置 15-30 分钟。如果痰很浓，可以延长保温时间。
3. 3000 g 室温离心 15 分钟，弃上清。
4. 将细菌沉淀放-20℃冰箱备用或直接进入细菌基因组 RNA 提取步骤。
三:分枝杆菌菌基因组 DNA 的提取
1. 向上述有分枝杆菌沉淀的离心管中加入 0.3mL 溶液 A，用枪充分吹打细菌沉 淀，确保细菌全部裂解，没有块状物。此时裂解物总体积 0.4mL。加入约 0.2 倍体积的自备氯仿(10.4mL 裂解物需 0.1 mL 氯仿)，振荡器上充分振荡混均 30 秒。
2. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟。将上清液（约 0.3mL）转移到离心吸附柱 中。注意：离心后下层有机相和中间层含有 DNA 和蛋白质，避免触及，否则 将产生蛋白质和 DNA 污染。
3. 加入等体积（约 0.3mL）的溶液 B，充分混匀后全部上柱。
4. 12000-15000 g 室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
5. 加 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，室温离心半分钟，弃收集管中的 穿 透液。一次洗涤一般足够去除杂质。但如果样品 OD260/280 比值不高，可 以再用 0.3 mL 通用洗柱液重复此步一次。
6. 室温 12000-15000 g 离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会 影响 RNA 的使用。
7. 将离心吸附柱转移到一自备的 RNase-free 收集管中，加入 30-100uL RNA 洗脱液，室温放置两分钟。
8. 室温离心半分钟，离心管中溶液即为 RNA 样品，可以立即使用或存放于 -80℃待用。
9. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做 Northern 杂交，强烈建议用户使用甲 醛变性胶进行 RNA 电泳，因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子。
10. RNA 产量产率测定：将 5-10 μL RNA 溶于 TE 缓冲液中(pH7.5-8.2 之间) 检测其在 OD260 的光吸收。通过光吸收可以得出 RNA 浓度（1OD260 的 RNA=40 μg/mL），进而计算出 RNA 的产量（浓度 X 体积)和产率(RNA 产 量/组织用量)。RNA 纯度测定：无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范 围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响 RT-PCR 等反应。
中文名称：柱式分枝杆菌RNAout
英文名称：Column Myco RNAout
产品规格：50次
产品货期：现货
产品运输：常温运输
产品介绍：提取分枝杆菌的总DNA
产品及特点：
分枝杆菌属（Mycobacterium）是极为古老的细菌，与人类的疾病相关的就有 25 种以上，包括引起结核病的结核分枝杆菌（Mycobacteria tuberculosis）。近 年来由于多重耐药性分枝杆菌的出现，分枝杆菌再次成为人们关心的细菌。PCR 快速诊断是目前检测分枝杆菌的主流方法，但由于此类细菌具有十分独特的坚硬的 细胞壁，快速提取其基因组 RNA 一直是十分棘手的技术问题。
柱式分枝杆菌RNAout具有下列特点：
1. 操作简单，客户不需要准备额外的试剂。
2. PCR 检测灵敏度一般在 10-100 CFU/mL 样品。
3. 既可以使用培养的细菌，也可以使用痰液、精液、血液、脑脊液等样品。
4. 价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格便宜。
5. 安全无毒，本试剂盒对人体无害，无腐蚀性和刺激性气味。
6. 本产品只能用于科研。
规格及成分：
| 成份 | 大纸盒包装 |
| 柱式分枝杆菌 RNAout 溶液 A | 25 mL |
| 柱式分枝杆菌 RNAout 溶液 B | 25 mL |
| 化痰液成分（干粉） | 5 克（10mL 瓶） |
| 离心吸附柱 | 50 套 |
| 通用洗柱液 | 50 mL |
| RNA 洗脱液 | 10 mL |
| 使用手册 | 1 份 |
运输及保存：常温运输及保存，但化痰液成分（干粉）需要低温运输、-20℃保存，有效期一年。
自备试剂：TE 缓冲液，氯仿。
本产品仅供科研
使用方法：
注意：试验所用的实验室环境、耗材等均需要 RNase-free。
一: 培养的分枝杆菌样品的预处理
1. 刮取培养的分枝杆菌到 0.5 mL 自备 TE 缓冲液中。
2. 80℃放置 20 分钟以杀灭细菌。
3. 3000 g 室温离心 15 分钟，弃上清。
4. 将细菌沉淀放-20℃冰箱备用或直接进入细菌基因组 RNA 提取步骤。
二: 含分枝杆菌的痰液样品的预处理
1. 将痰液样品(0.5mL-2mL)加入到干净的 10 mL 或 15 mL 塑料离心管中。
2. 加 2mL 的自备蒸馏水，在加入 100mg 化痰液干粉，充分混合均匀后室温放 置 15-30 分钟。如果痰很浓，可以延长保温时间。
3. 3000 g 室温离心 15 分钟，弃上清。
4. 将细菌沉淀放-20℃冰箱备用或直接进入细菌基因组 RNA 提取步骤。
三:分枝杆菌菌基因组 DNA 的提取
1. 向上述有分枝杆菌沉淀的离心管中加入 0.3mL 溶液 A，用枪充分吹打细菌沉 淀，确保细菌全部裂解，没有块状物。此时裂解物总体积 0.4mL。加入约 0.2 倍体积的自备氯仿(10.4mL 裂解物需 0.1 mL 氯仿)，振荡器上充分振荡混均 30 秒。
2. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟。将上清液（约 0.3mL）转移到离心吸附柱 中。注意：离心后下层有机相和中间层含有 DNA 和蛋白质，避免触及，否则 将产生蛋白质和 DNA 污染。
3. 加入等体积（约 0.3mL）的溶液 B，充分混匀后全部上柱。
4. 12000-15000 g 室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
5. 加 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，室温离心半分钟，弃收集管中的 穿 透液。一次洗涤一般足够去除杂质。但如果样品 OD260/280 比值不高，可 以再用 0.3 mL 通用洗柱液重复此步一次。
6. 室温 12000-15000 g 离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会 影响 RNA 的使用。
7. 将离心吸附柱转移到一自备的 RNase-free 收集管中，加入 30-100uL RNA 洗脱液，室温放置两分钟。
8. 室温离心半分钟，离心管中溶液即为 RNA 样品，可以立即使用或存放于 -80℃待用。
9. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做 Northern 杂交，强烈建议用户使用甲 醛变性胶进行 RNA 电泳，因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子。
10. RNA 产量产率测定：将 5-10 μL RNA 溶于 TE 缓冲液中(pH7.5-8.2 之间) 检测其在 OD260 的光吸收。通过光吸收可以得出 RNA 浓度（1OD260 的 RNA=40 μg/mL），进而计算出 RNA 的产量（浓度 X 体积)和产率(RNA 产 量/组织用量)。RNA 纯度测定：无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范 围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响 RT-PCR 等反应。
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柱式分枝杆菌RNAout
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