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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
29
- 英文名：
Lipoprotein lipase，LPL
- CAS号：
/
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/48样
脂蛋白酯酶（Lipoprotein lipase，LPL）试剂盒说明书
微量法100T/48S
注 意 ：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
脂蛋白酯酶是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞及巨噬细胞等实质细胞合成的一种酶，可催化甘油三脂水解为脂肪酸和单酸甘油酯，以供组织氧化供能和贮存，并在不同的组织表现出不同的生理意义。
测定原理：
脂蛋白酯酶水解4-硝基/苯棕榈酸酯产生4-硝基/苯酚，在400nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：
天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
试剂组成和配制 ：
试剂一：液体105mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体4mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保存。
样品处理：
测定操作：
计算公式：
1．按照蛋白浓度计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每毫克蛋白每分钟水解产生1μmol 4-硝基/苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.0169）÷ 0.0581×V反总÷（V样×Cpr）÷T
= 17.21×（△A+0.0169）÷Cpr
2．按照样本质量计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每克组织每分钟水解产生1μmol 4-硝基/苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol /min/g 鲜重）=（△A+0.0169）÷0.0581×V反总÷（W×V样÷V样总）÷T
= 17.21×（△A+0.0169）÷W
3．按照细胞数量计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每104个细胞每分钟水解产生1μmol 4-硝基/苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol /min/104 cell）= （△A+0.0169）÷0.0581×V反总÷（V样×细胞数量÷V样总）÷T
= 17.21×（△A+0.0169）÷细胞数量
4．按照液体体积计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每毫升血清每分钟水解产生1μmol 4-硝基/苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol /min/mL）=（△A+0.0169）÷0.0581×V反总÷V样÷T
= 17.21×（△A+0.0169）
V反总：反应总体积，0.2mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.02mL；W：样本质量，g；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，10min
b．用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y= 0.029x -0.0169，R2=0.9982
1．按照蛋白浓度计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每毫克蛋白每分钟水解产生1μmol 4-硝基/苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.0169）÷ 0.029×V反总÷（V样×Cpr）÷T
= 34.42×（△A+0.0169）÷Cpr
2．按照样本质量计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每克组织每分钟水解产生1μmol 4-硝基/苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol /min/g 鲜重）=（△A+0.0169）÷0.029×V反总÷（W×V样÷V样总）÷T
= 34.42×（△A+0.0169）÷W
3．按照细胞数量计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每104个细胞每分钟水解产生1μmol 4-硝基/苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol /min/104 cell）= （△A+0.0169）÷0.029×V反总÷（V样×细胞数量÷V样总）÷T
=34.42×（△A+0.0169）÷细胞数量
4．按照液体体积计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每毫升血清每分钟水解产生1μmol 4-硝基/苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol /min/mL）=（△A+0.0169）÷0.029×V反总÷V样÷T
= 34.42×（△A+0.0169）
V反总：反应总体积，0.2mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.02mL；W：样本质量，g；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，10min
注意事项：
微量法100T/48S
注 意 ：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
脂蛋白酯酶是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞及巨噬细胞等实质细胞合成的一种酶，可催化甘油三脂水解为脂肪酸和单酸甘油酯，以供组织氧化供能和贮存，并在不同的组织表现出不同的生理意义。
测定原理：
脂蛋白酯酶水解4-硝基/苯棕榈酸酯产生4-硝基/苯酚，在400nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：
天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
试剂组成和配制 ：
试剂一：液体105mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体4mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保存。
样品处理：
- 组织：按照质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL试剂一）加入试剂一，冰浴匀浆后于4℃，10000g离心10min，取上清待测。
- 细胞：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一）加入试剂一，冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后于4℃，10000g离心10min，取上清待测。
- 血清：直接测定。
测定操作：
| 对照管 | 测定管 | |
| 样品（μL） | 20 | 20 |
| 试剂一（μL） | 80 | |
| 试剂二（μL） | 80 | |
| 混匀，45℃水浴10min | ||
| 试剂三（μL） | 100 | 100 |
| 充分混匀，25℃静置2min，于微量石英比色皿/96孔板，测定400nm处吸光值，记为A对照管和A测定管，△A=A测定管- A对照管 | ||
计算公式：
- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1．按照蛋白浓度计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每毫克蛋白每分钟水解产生1μmol 4-硝基/苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.0169）÷ 0.0581×V反总÷（V样×Cpr）÷T
= 17.21×（△A+0.0169）÷Cpr
2．按照样本质量计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每克组织每分钟水解产生1μmol 4-硝基/苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol /min/g 鲜重）=（△A+0.0169）÷0.0581×V反总÷（W×V样÷V样总）÷T
= 17.21×（△A+0.0169）÷W
3．按照细胞数量计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每104个细胞每分钟水解产生1μmol 4-硝基/苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol /min/104 cell）= （△A+0.0169）÷0.0581×V反总÷（V样×细胞数量÷V样总）÷T
= 17.21×（△A+0.0169）÷细胞数量
4．按照液体体积计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每毫升血清每分钟水解产生1μmol 4-硝基/苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol /min/mL）=（△A+0.0169）÷0.0581×V反总÷V样÷T
= 17.21×（△A+0.0169）
V反总：反应总体积，0.2mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.02mL；W：样本质量，g；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，10min
b．用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y= 0.029x -0.0169，R2=0.9982
1．按照蛋白浓度计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每毫克蛋白每分钟水解产生1μmol 4-硝基/苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.0169）÷ 0.029×V反总÷（V样×Cpr）÷T
= 34.42×（△A+0.0169）÷Cpr
2．按照样本质量计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每克组织每分钟水解产生1μmol 4-硝基/苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol /min/g 鲜重）=（△A+0.0169）÷0.029×V反总÷（W×V样÷V样总）÷T
= 34.42×（△A+0.0169）÷W
3．按照细胞数量计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每104个细胞每分钟水解产生1μmol 4-硝基/苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol /min/104 cell）= （△A+0.0169）÷0.029×V反总÷（V样×细胞数量÷V样总）÷T
=34.42×（△A+0.0169）÷细胞数量
4．按照液体体积计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每毫升血清每分钟水解产生1μmol 4-硝基/苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol /min/mL）=（△A+0.0169）÷0.029×V反总÷V样÷T
= 34.42×（△A+0.0169）
V反总：反应总体积，0.2mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.02mL；W：样本质量，g；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，10min
注意事项：
- 试剂三加入混匀后静置两分钟立即测定，否则影响吸光值。
- 吸光值过高或者测定结果不稳定，则将酶液进行适当的稀释，并在计算公式中乘以稀释倍数。
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文献和实验该产品被引用文献
脂蛋白酯酶（Lipoprotein lipase，LPL）试剂盒
相关实验
脂蛋白 lipoprotein ， lipoproteid 为脂质和蛋白质的复合体。大致可分为生物膜等上面的不溶性的脂蛋白及血浆和卵黄中的水溶性脂蛋白。狭义的脂蛋白多指后者。历史上库恩（ E ． J ． Cohn ）等用乙醇沉淀区段法将血清脂蛋白分离，而称为α 1 、β - 脂蛋白。以后建立了用超离心机的上浮法（ floatation method ）作为分离方法。现在分离成由比重低的开始依次为乳糜微粒、超低密度脂蛋白（ very low density lipoprotein
低密度脂蛋白 low density lipoprotein
为血清蛋白的一种。缩写为 LDL。亦称为β脂蛋白。在血清中含量约 300mg／ dl，胆固醇约占 50％， B蛋白为 20％。是动脉硬化的促进因子。
高密度脂蛋白 high density lipoprotein
血清蛋白之一。缩写为 HDL。亦称为 a1 脂蛋白。比较富含磷脂质，在血清中的含量约为 300mg／ dl。其蛋白质部分， A－Ⅰ约为 75％， A－Ⅱ约为 20％。由于可输出胆固醇促进胆固醇的代谢，所以现在作为动脉硬化预防因子而受到重视。
技术资料文献支持
脂蛋白酯酶（Lipoprotein lipase，LPL）试剂盒
￥780
