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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
26
- 英文名:
Solid-β-Glucosidase,S-β-GC
- CAS号:
/
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100管/96样
微量法100管/48样
注 意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
S-β-GC能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分之一,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。
测定原理:
S-β-GC能够催化对-硝基/苯-β-D吡喃葡萄糖苷生成对-硝基/苯酚,后者在400nm有特征光吸收。
自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:甲苯5mL×1瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入10mL蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存;
试剂三:液体20mL×1瓶,4℃保存;
试剂四:液体15mL×1瓶,4℃保存;
样品处理:
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。
测定步骤:
- 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。
- 加样表
| 试剂名称 | 测定管 | 对照管 |
| 风干土样(g) | 0.02 | 0.02 |
| 试剂一(μL) | 10 | 10 |
| 室温振荡混匀15min | 90℃振荡混匀15min | |
| 试剂二(μL) | 130 | |
| 蒸馏水 | 130 | |
| 试剂三(μL) | 160 | 160 |
10000g 25℃离心10min,取上清液(在EP管或96孔板中加入下列试剂)
| 上清液(μL) | 70 | 70 |
| 试剂四(μL) | 130 | 130 |
S-β-GC活力计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 0.0032x -0.0027;x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。
单位的定义:每天每g土样中产生1 μmol对-硝基/苯酚定义为一个酶活力单位。
S-β-GC活力(μmol/d/g 土样)= (ΔA+0.0027) ÷0.0032×V反总÷W÷T =112.5×(ΔA+0.0027)
T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积:3×10-4 L;W:样本质量,0.02g。
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 0.0016x -0.0027;x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。
单位的定义:每天每g土样中产生1 μmol对-硝基/苯酚定义为一个酶活力单位。
S-β-GC活力(μmol/d/g 土样)= (ΔA+0.0027) ÷0.0016×V反总÷W÷T =225×(ΔA+0.0027)
T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积:3×10-4 L;W:样本质量,0.02g。
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