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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
细胞系
- 细胞类型:
详见说明书
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海博尔森生物科技有限公司
- 库存:
大量
- 英文名:
Mouse T Lymphocytes Cells
- 生长状态:
悬浮生长
- 年限:
永久
- 运输方式:
干冰或常温
- 器官来源:
T 细胞
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
小鼠
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
T 细胞
- 规格:
株
规格:1x106cells/T25或1mL冻存管 形态:淋巴母细胞样,悬浮生长
培养基:RPMI-1640+10% FBS+100IU/ml IL2或mouseIL2+1% P/S
传代比例:1:2至1:3,每周 2-3次
| 一、细胞基本属性 | ||||
| 细胞名称 | CTLL-2小鼠T淋巴细胞 | |||
| 细胞别称 | CTLL-2;CTLL2; CTLL(2);小鼠T淋巴细胞 | |||
| 种属来源 | 小鼠 | |||
| 组织来源 | T 细胞 | |||
| 生长特性 | 悬浮生长 | |||
| 细胞形态 | 淋巴母细胞样 | |||
| 细胞代数 | 10代以内 | |||
| 背景介绍 | CTLL-2细胞源自C57BL/6的细胞毒性的T淋巴细胞,是一株具有细胞毒作用的IL-2依赖型的T-细胞株。 | |||
| 生物安全等级 | 1 | |||
| 细胞规格 | 1x106cells/T25或1mL冻存管 | |||
| 支原体检测 | 无 | |||
| 保藏机构 | ATCC; TIB-214 DSMZ; ACC-27 ECACC; 93042610 | |||
| 培养基 | RPMI-1640+10% FBS+100IU/ml IL2或mouseIL2+1% P/S | |||
| 培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ | |||
| 冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 | |||
| 受体表达情况 | interleukin 2 (IL-2), expressed | |||
| 特别注意 | 1、该细胞复苏第一、二天死亡下降到10%正常,一般第四天恢复。 2、细胞一三五传代,按0.02M/ml-0.02M/ml-0.015M/ml 铺瓶 3、需及时传代,密度超过0.5M/ml,24H后细胞大量死亡 4、最高养4个月,约传代50次 5、冻存密度应达到6-10M/管 |
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| 产品货期 | 现货,1周左右 | |||
| 运输方式 | 复苏发货(T25瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递 | |||
| 供应限制 | 仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 | |||
| 特别说明 | 以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主 | |||
| 二、细胞培养操作 | ||||
| 收货方式 | T25瓶 | 冻存管 | ||
| 收货处理 | 观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37度培养箱放置4-6h,以便稳定细胞状态 | 收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏 | ||
| 传代密度 | 细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养 | 第二天换液并检查细胞密度 | ||
| 传代比例 | 首次传代建议1:2传代 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿 |
一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶 | ||
| 传代方法 | 收集细胞,1000RPM条件下离心3-5min分钟,弃去上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按0.02M/ml的密度分到含新培养基的新皿中或者瓶中。 在IL2充分的情况下,细胞生长旺盛,隔天细胞数翻10倍以上,需及时传代,密度超过0.5M/ml,24H后细胞大量死亡。 |
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL 20%FBS含200IU IL2的培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3-5 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后轻轻吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液(培养基补足到10ml,加入100IU IL2)并检查细胞密度。 | ||
| 注意事项 | 悬浮细胞收货注意事项: 1、收货时需镜下拍照(看密度、状态) 2、静置后需镜下拍照(看整体密度) a.如密度50%以下,建议换液并竖瓶培养 b.如密度50%-80%,建议换液培养,隔天观察密度 c.如密度90%,建议传代 3、换液及传代处理前,培养瓶竖着放置至少半小时(使细胞沉到瓶底);收集上清,必须将瓶内所有培养基(70ml)全部收集!并用PBS(10ml)润洗瓶底并收集!离心转速为1000rpm,5min。 4.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 5.因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。 |
1.收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存; 2.为保证细胞的高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞。 |
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| 到货须知 | 1.收到细胞后,首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发,细胞是否解冻,若有上述现象发生请及时和我们联系。 2.静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照),记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。 3.由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 4.仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。 |
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| 备注:客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打技术服务电话:13166061152,我们随时给予解答。 | ||||
| 三、细胞冻存操作 | ||||
| 冻存液配方 | 无血清冻存液,液氮储存 | |||
| 细胞密度 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例 | |||
| 冻存方法 | a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,加 1 mL血清重悬细胞,进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x106~1x107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
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| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 | |||
| 四、售后服务 | ||||
| 重发标准 | 1.细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发; 2.收到细胞未开封,如出现污染状况,重发; 3.收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发; 4.常温发货的细胞静置 2 小时后,干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发; 5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后,出现污染,经核实后,重发; 6.细胞活性问题,请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发; 7.视具体情况而定。 |
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| 不予重发 | 1.客户操作造成细胞污染,不重发; 2.客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发; 3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发; 4.细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片,不重发; 5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发; 6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发; 7.视具体情况而定。 |
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特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验一、材料与试剂 1. 小鼠2. 抗CD3与抗CD28抗体(Biolegend,100302,102102)3. 白细胞介素-2(IL-2)(R&Dsystems402-ML-020)4. 聚凝胺(Polybrene)(hexadimethrinebromide,SIGMAH9268)5. RPMI-1640培养基(GIBCO,11875-093)6. FBS(GEMBIO900-108)7. 青霉素/链霉素溶液(GIBCO15140-122)8. 2-巯基
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