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- 2025年12月17日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
24
- 英文名：
S-C1
- CAS号：
/
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/48样
土壤外切-β-1，4-葡聚糖酶/纤维二糖苷酶（S-C1）活性测定试剂盒说明书
微量法100管/48样
注 意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
C1（EC3.2.1.91）存在于细菌、真菌和动物体内，是纤维素酶系的组份之一，C1催化多聚糖链的末端非还原端释放出纤维二糖和葡萄糖。
测定原理：
采用3,5－二硝基水杨酸法测定S-C1催化微晶纤维素降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品：
酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体6mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：液体25mL×1瓶，4℃保存；
样品测定的准备：
称取约0.1g新鲜土样或风干土样，加入1mL提取液，进行冰浴匀浆，室温振荡提取30min，然后10000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：
混匀，37℃准确水浴2h
混匀， 90℃水浴10min（盖紧，防止水分散失），冷却后，取200μL至微量石英比色皿或96孔板中，测540nm下吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。
S-C1活性计算：
标准条件下测定回归方程为y = 6.4078x - 0.0673；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。
单位的定义：每g土样每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-C1活力(μg /min /g鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反总]÷(W× V样÷V样总) ÷T
=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W
1000：1mg/mL=1000ug/mL；V反总：反应体系总体积，0.11mL； V样：加入样本体积，0.01 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，120 min； W：样本质量，g；
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定回归方程为y = 3.2039x - 0.0673；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。
单位的定义：每g组织每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-C1活力(μg /min /g鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷3.2039×V反总]÷(W× V样÷V样总) ÷T
=28.61×(ΔA+0.0673) ÷W
1000：1mg/mL=1000ug/mL；V反总：反应体系总体积，0.11mL； V样：加入样本体积，0.01 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，120 min； W：样本质量，g。
微量法100管/48样
注 意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
C1（EC3.2.1.91）存在于细菌、真菌和动物体内，是纤维素酶系的组份之一，C1催化多聚糖链的末端非还原端释放出纤维二糖和葡萄糖。
测定原理：
采用3,5－二硝基水杨酸法测定S-C1催化微晶纤维素降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品：
酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体6mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：液体25mL×1瓶，4℃保存；
样品测定的准备：
称取约0.1g新鲜土样或风干土样，加入1mL提取液，进行冰浴匀浆，室温振荡提取30min，然后10000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：
- 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
| 试剂名称（μL） | 测定管 | 对照管 |
| 样本 | 10 | 10 |
| 试剂一 | 100 | |
| 蒸馏水 | 100 |
| 试剂二 | 200 | 200 |
S-C1活性计算：
- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定回归方程为y = 6.4078x - 0.0673；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。
单位的定义：每g土样每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-C1活力(μg /min /g鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反总]÷(W× V样÷V样总) ÷T
=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W
1000：1mg/mL=1000ug/mL；V反总：反应体系总体积，0.11mL； V样：加入样本体积，0.01 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，120 min； W：样本质量，g；
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定回归方程为y = 3.2039x - 0.0673；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。
单位的定义：每g组织每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-C1活力(μg /min /g鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷3.2039×V反总]÷(W× V样÷V样总) ÷T
=28.61×(ΔA+0.0673) ÷W
1000：1mg/mL=1000ug/mL；V反总：反应体系总体积，0.11mL； V样：加入样本体积，0.01 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，120 min； W：样本质量，g。
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文献和实验该产品被引用文献
土壤外切-β-1，4-葡聚糖酶/纤维二糖苷酶（S-C1）活性测定试剂盒
相关实验
纤维素是地球上最丰富的可再生有机资源，其生物降解完全是微生物--细菌和真菌完成的。1、真菌：分泌胞外游离的纤维素酶，以水解酶机制和氧化酶机制降解纤维素。2、细菌纤维素酶则是以形成多酶复合体结构而起作用，能更加彻底有效地降解天然纤维素。纤维素完全降解需要三类酶的协同作用：内切葡聚糖酶、外切葡聚糖纤维二糖水解酶、B-葡萄糖苷酶。目前、纤维素酶的研究热点有：1、以纤维素为添加剂 生产可完全降解的塑料。存在的问题是高产完整活性的工程菌的获得存在困难，对纤维素酶基因克隆酵母分泌表达系统是目前研究的热点
。水解后产生等量的D-葡萄糖和D-果糖，这个混合物称为转化糖，甜度为160。蜜蜂体内有转化酶，因此蜂蜜中含有大量转化糖。因为果糖的比旋比葡萄糖的绝对值大，所以转化糖溶液是左旋的。在植物中有一种转化酶催化这个反应。口腔细菌利用蔗糖合成的右旋葡聚糖苷是牙垢的主要成分。 （四）纤维二糖 是纤维素的基本构成单位。可由纤维素水解得到。由两个β-D-葡萄糖通过C1－C4相连，它与麦芽糖的区别是后者为α-葡萄糖苷。 （五）海藻糖 α-D-吡喃葡萄糖-(1→1)- α-D-吡喃
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土壤外切-β-1，4-葡聚糖酶/纤维二糖苷酶（S-C1）活性测定试剂盒
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