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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
66
- 英文名:
/
- CAS号:
/
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100管/96样
微量法100T/96S
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
血清铁是指血液中转铁蛋白所结合的铁,该指标常用于鉴别缺铁性与非缺铁性贫血。
测定原理:
亚硫酸钠还原血清Fe3+生成成Fe2+,Fe2+进一步与2, 2’- 联吡啶显色,在520nm处有吸收峰,测定该波长光吸收值即可计算血清铁含量。
自备仪器和用品:
离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、冰醋/酸、氯仿和蒸馏水。
试剂组成和配置:
试剂一:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前配制,加入15 mL蒸馏水充分溶解。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前配制,加入469μL冰醋/酸,加入15 mL蒸馏水充分溶解。
标准液:液体1mL×1支(EP管),100 μmol/L Fe3+标准液,4℃保存。
测定:
1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到520 nm,蒸馏水调零。
2. 标准液解冻:提前取出标准液,置于室温下充分解冻后混匀。
3. 空白管:取EP管,依次加入125 μL蒸馏水,125 μL试剂一,125 μL试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62 μL氯仿(自备),充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210 μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为A空白管。
4. 标准管:取EP管,依次加入125 μL标准液,125 μL试剂一,125 μL试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62 μL氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210 μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为A标准管。
5. 测定管:取EP管,依次加入125 μL血清,125 μL试剂一,125 μL试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62 μL氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210 μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为A测定管。
注意:空白管和标准管只需测定一次。
血清铁浓度计算公式:
血清铁含量(μmol /dL)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总
=10 × (A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
C标准液:100 μmol/L Fe3+标准液;V总:标准液总体积1mL;1 dL=0.1 L。
注意事项:
1、血清铁含量少,所用器皿(EP管)需要注意,避免被铁污染。
2、试剂一和试剂二溶液不稳定,需现配现用,新配制的试剂只能当天使用。
3. 最低检出限为1μmol/L。
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文献和实验【回归分析】关于相关与回归——笔者通过自己的文章教你如何化繁为简!
(GAMLSS),见图 2-5 和图 2-6。 可见年龄增高、CRP 浓度增加,血清铁蛋白的人群水平变化增加,数据可信区间增大。这样我们可以进一步通过不同模型的比较,选择最为合适的模型对数据进行描述和回归建立预测模型。 图 2-5 男性铁蛋白与年龄、C 反应蛋白关系的 GAMLSS 回归模型图 图 2-6 女性铁蛋白与年龄、C 反应蛋白关系的 GAMLSS 回归模型图 可见,通过文献阅读、专业知识判断,加强对于数据的理解,数据之间的相关关系会更加明朗,建立的回归模型会更加合适。 数据呈现出的表观
【贫血实验室检查】 一、血象 早期或轻度缺铁可以没有贫血或仅极轻度贫血。晚期或严重缺铁有典型的小细胞低色素型贫血。红细胞压积和血红蛋白浓度降低的程度通过红细胞计数减少的程度。还可见很少的靶形、椭圆形或其他不规则形态的红细胞。网织红细胞计数大多正常,白细胞计数正常或轻度减低。血小板计数高低不一。 二、骨髓象 骨髓增生活跃,粒红比例降低,红细胞系统增生明显活跃。中幼红细胞比例增多,医学教|育网搜集整理体积比一般的中幼红细胞略小,边缘不整齐,胞浆少,染色偏兰
的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。由此,TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型,绿色荧光)为例) TUNEL检测:使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min,再使用二甲苯脱蜡2次,每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
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