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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
20
- 英文名:
/
- CAS号:
/
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100管/96样
微量法100管/96样
注 意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
直链淀粉是D-葡萄糖基以a-(1,4)糖苷键连接的多糖链,其含量测定对于评价食品营养价值和调查植物体内糖代谢都有重要意义。
测定原理:
利用80%乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开,直链淀粉与碘形成的络合物在620nm下有吸收峰。
需自备的仪器和用品:
酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研钵、冰、yi醚和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
试剂一:液体100mL×1瓶;4℃保存;
试剂二:yi醚100mL×1瓶;(自备)
试剂三:液体100mL×1瓶;4℃保存;
试剂四:液体2mL×1瓶;4℃保存;
试剂五:液体300uL×1瓶;4℃保存;
淀粉提取:
称取0.01~0.02g烘干样本(建议称取约0.01g)于研钵中研碎,加入1mL试剂一,充分匀浆后转移到EP管中,80℃水浴提取30min,3000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀,加入1mL试剂二(yi醚)振荡5min,3000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀,加入1mL试剂三充分溶解,90℃水浴10min,冷却后待测。
测定步骤:
- 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至620nm,蒸馏水调零。
空白管:在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20μL试剂三, 14μL试剂四,120μL蒸馏水,2μL试剂五,44μL蒸馏水,混匀,测定620nm处吸光值,记为A空白。
直链淀粉含量计算:
- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、按照蛋白浓度计算
直链淀粉含量(mg/mg prot)=[(A测定-A空白-0.0062)×V1]÷1.755 ÷(V1×Cpr)=0.57×(A测定-A空白-0.0062) ÷Cpr
2、按样本干重计算
直链淀粉含量(mg/g干重)= [(A测定-A空白-0.0062)×V1] ÷1.755÷(W×V1÷V2) =0.57×(A测定-A空白-0.0062) ÷W
V1:加入反应体系中样本体积,0.02mL;V2:加入提取液体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g
- 用96孔板测定的计算公式如下
1、按照蛋白浓度计算
直链淀粉含量(mg/mg prot)=[(A测定-A空白-0.0062)×V1]÷0.8775 ÷(V1×Cpr)=1.14×(A测定-A空白-0.0062) ÷Cpr
2、按样本干重计算
直链淀粉含量(mg/g干重)= [(A测定-A空白-0.0062)×V1] ÷0.8775/(W×V1÷V2) =1.14×(A测定-A空白-0.0062) ÷W
V1:加入反应体系中样本体积,0.02mL;V2:加入提取液体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g
最低检测限为1mg/g干重或10μg/mgprot。
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文献和实验一、目的淀粉一般都是直链淀粉和支链淀粉的混合物。直链淀粉和支链淀粉含量和比例因植物种类而不同,决定着谷物种子的出饭率和食味品质,并影响着谷物的贮藏加工。通过本实验学习掌握双波长测定谷物中直链淀粉和支链淀粉的含量。二、原理根据双波长比色原理,如果溶液中某溶质在两个波长下均有吸收,则两个波长的吸收差值与溶质浓度成正比。直链淀粉与碘作用产生纯蓝色,支链淀粉与碘作用生成紫红色。如果用两种淀粉的标准溶液分别与碘反应,然后在同一个坐标系里进行扫描( 400 - 960 mm) 或做吸收曲线对含有直链淀粉
淀粉 是葡萄糖的高聚体,水解到二糖阶段为麦芽糖,完全水解后得到葡萄糖。淀粉有直链淀粉和支链淀粉两类。直链淀粉含几百个葡萄糖单元,支链淀粉含几千个葡萄糖单元。在天然淀粉中直链的约占 22 %~ 26 %,它是可溶性的,其余的则为支链淀粉。当用碘溶液进行检测时,直链淀粉液呈显蓝色,而支链淀粉与碘接触时则变为红棕色。 淀粉是植物体中贮存的养分,存在于种子和块茎中,各类植物中的淀粉含量都较高,大米中含淀粉 62 %~ 86 %,麦子中含淀粉 57 %~ 75 %,玉蜀黍
针对同一指标,生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗?
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律,但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应,其反应过程可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图,如下所示: 延迟区:无规律可寻。 等速区:对应的是速率法,一般应用于酶活力的检测。 过渡区:对应的是固定时间法,目的是解决某些化学反应的非特异性问题,提高准确度。 平衡区:对应的是终点法,主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
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