CHO-K1 中国仓鼠卵巢细胞(悬浮细胞)细胞介绍
该细胞株是源自成年中国仓鼠卵巢深入活体组织切片的CHO细胞的亚克隆。
CHO-K1 中国仓鼠卵巢细胞(悬浮细胞)细胞特性
1) 来源:卵巢
2) 形态:上皮细胞
3) 含量:>1x10^6 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。
细胞株驯化:
复苏CHO-K1细胞转入T25 cm2细胞培养瓶,以F12K基础培养基添加10%血清培养,待细胞长满单层后,加入 0.25 % 胰蛋白酶消化,传代至装有完全培养基的T25 cm2细胞培养瓶(Corning)中继续培养,当细胞铺满瓶底时,即得贴壁 CHO-K1 细胞。取贴壁CHO-K1 细胞,换液,加入15 mL含血清的完全基和 15 mL无血清CHO-K1专用培养基,2天后吸出一半培养液,加入等量的无血清CHO-K1,每2天重复一次此操作,直到胎牛血清浓度低于 1 %后,以基础培养基B001 继续培养,即培养基中血清浓度依次以 5 %,2 .5 %,1.25%,0.625 %,0 %降低。细胞在无血清CHO-K1专用培养基中密度达到5 ×10^6cells/ mL时,即得悬浮 CHO-K1 细胞。培养条件:37℃,5 % CO2培养箱中静置培养。
CHO-K1 中国仓鼠卵巢细胞(悬浮细胞)运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
CHO-K1 中国仓鼠卵巢细胞(悬浮细胞)培养基及培养冻存条件准备:
1)准备: CHO GROW CD2 培养基 98 % GlutaMAX-1谷氨酰胺 1%,P/S青霉素-链霉素 1%
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90% CHO-K1专用培养基,10%DMSO,现用现配。
CHO-K1 中国仓鼠卵巢细胞(悬浮细胞)接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
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