C2C12小鼠成肌细胞(提供种属鉴定)细胞介绍
这株细胞是D. Yaffe和O. Saxel建立的小鼠成肌细胞株的亚克隆(由H. Blau等人构建)。C2C12细胞株可在低血清饥饿下分化,形成可伸缩的肌管并表达特征性的肌蛋白。如用骨形成蛋白2(BMP-2)处理后,分化途径从成肌细胞转换成成骨细胞。检测表明鼠痘病毒(ectromelia virus,ECTV)阴性。该细胞复苏后不耐受长时间运输,邮寄后会有细胞脱落、坏死等现象,有条件请选用干冰冷链快递或复苏后上门自取。通过本库诱导分化测试,在2%马血清刺激下可诱导分化形成肌纤维。
C2C12小鼠成肌细胞(提供种属鉴定)细胞特性
1) 来源:组织: 肌肉 品系:C3H
2) 形态:成肌细胞 贴壁生长
3) 含量:>1x106 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。
C2C12小鼠成肌细胞(提供种属鉴定)运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
C2C12小鼠成肌细胞(提供种属鉴定)培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。
备注:C2C12细胞生长较快,培养时细胞密度不可过高,否则容易分化,该细胞复苏后不耐受长时间运输,邮寄后会有细胞脱落、坏死等现象,有条件请选用干冰冷链快递或复苏后上门自取。收到邮寄活细胞的,收集上清离心后收集脱落的悬浮细胞和贴壁细胞一起建议T25培养瓶1:2传代培养。参考传代比例:根据细胞数量决定, 细胞密度应控制在 5000 – 15000 活细胞/平方厘米。传代周期2-3天,隔天换液。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
C2C12小鼠成肌细胞(提供种属鉴定)接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
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